亲和层析介质
高效+简单+快速
亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理,将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。常用的生物亲和关系有酶-底物、底物类似物、抑制剂、激活剂、辅因子,抗体-抗原,激素-受体蛋白、载体蛋白,外源凝集素-多糖、糖蛋白、细胞表面受体,核酸-互补核苷酸序列、组蛋白、核酸结合蛋白等,具有高效、简单、快速的优点,是当前最为理想的分离纯化蛋白的方法。
博奥龙纯化填料
高效+简单+快速
蛋白纯化是一项复杂的过程,包括粗分离、初步纯化和精细纯化等多个步骤。实验方法包括抽提、沉淀、离心、层析等多种手段。博奥龙纯化填料纯化方式主要采用亲和层析方式,它是以高度交联的琼脂糖凝胶为基质,通过化学偶联方式或在天然蛋白的基础上进行生物加工获得稳定配体,此层析介质(基质+配体组成)具有高流通、高载量、特异性优良、耐压等特点,可以在相对较高的流速下对目的蛋白进行纯化。目前,博奥龙拥有蛋白A、蛋白G、蛋白L、YFP标签、RFP标签、MYC标签、HA标签、HIS标签、离子交换、抗原亲和等纯化填料可供选择,如下表所示:
纯化填料测试效果
高效+简单+快速
实验小贴士
在对目标蛋白的特性或样品成分不太了解,可尝试几种不同的纯化方法:
一、使用最通用的凝胶过滤方法,选择分离范围广泛的介质如Superose、Sephacryl HR根据分子量将样品分成不同组份。
二、用含专一配体或抗体的亲和层析 介质结合目标蛋白。也可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质,再用以结合目标蛋白。一部即可得到高纯度样品。
三、大体积的样品、常使用离子交换层析 加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品,可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理,洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。