流式胞内染色步骤
(使用FIX & PERM固定破膜)
制备好细胞悬液,取100ul
(全血样本:人100ul,小鼠30~50ul)
染表面抗体,室温避光孵育15min,不用洗涤
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加入FIX&PERM Reagent A 100ul室温孵育15min
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加入3ml流式染色缓冲液(Flow Cytometry Staining Buffer)
300g 离心5min 弃上清收集细胞
液体尽量倒干净,不要残留
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涡旋混匀沉淀,加入FIX&PERM Reagent B
100ul和胞内抗体
(同型对照管加入同等剂量的抗体)
混匀,室温避光孵育20min
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加入3ml流式染色缓冲液,300g离心5min弃上清收集细胞
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用0.5ml 流式染色缓冲液重悬后立即上机。
或者加入0.5ml 0.1~4%多聚甲醛避光4℃保存24小时内上机分析
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厂商 | 目录号 | 产品名称 | 规格 |
MultiSciences | 70-S1001 | Flow cytometry Staining buffer | 125ml |
MultiSciences | 70-F0001 | 多聚甲醛溶液,4% | 100mL |
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MultiSciences | 70-GAS005 | FIX&PERM Kit | 100T |
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MultiSciences | 70-GAS008 | FIX&PERM Kit | 1000T |