大肠杆菌0157测试片原理及适用范围
1、原理及适用范围
大肠杆菌0157测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有选择性培养基和专一性的酶显色剂,菌落在测试片上呈蓝色,这样可缩短计数时间和增强计数效果。本产品适合于各类食品及饮用水中大肠杆菌0157:H7的测定,
2、使用方法
2.1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成 1:10的样品匀液,必要时用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH至6.6~7.2。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品 匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换一支吸管。
2.2、接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直 接吸取原液进行检测。将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层 膜缓慢盖下,静置10s左右使培养基凝固,每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。
2.3、培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。一般食品培养温度为36℃±1℃,培养15~24h;水产品培养温度为30℃±1℃,培养48h。
3、结果判读
培养后,测试片上紫红色菌落为大肠杆菌0157:H7,蓝色菌落为其他大肠菌群菌落。出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验一次。