在我们的肠道内“居住”着100万亿个微生物,其重量1.5-2 kg,分属于1000多个种,主要包括细菌和古细菌。这些肠道微生物参与到人类的代谢及免疫过程中。目前已有研究发现,肠道微生物与某些胃肠的疾病及代谢性疾病,如溃疡性结肠炎、糖尿病、肥胖症有重要关系。并且,肠道微生物的群落结构会随着人饮食、生活习惯的调整而变化,再反过来影响人体健康水平。
微基生物运用分子生物学结合高通量测序的方法,可以得到肠道中绝大部分微生物的信息,并通过生信/统计分析,对大量数据进行处理和分析,找到在肠道中与环境因子(疾病等)相关的微生物群落组成,从而达到预防疾病的发生的目的。
肠道微生态分析流程
- 样品采集及运送:
新鲜样品:≥ 2 g(约一节小拇指大小)。采集时应避免厕所污水及马桶上微生物的污染。可先收集于无菌的医用粪便收集器皿中,再转移到专用的无菌粪便采集管中。
DNA样品:样品需求量:≥ 300 ng;样品浓度:≥ 10 ng/μL;样品纯度:OD260/280=1.8-2.0并确保DNA无降解;
样品运送:干冰或冰袋保存寄运。
- 生信/统计分析
案例分析:
标题:巴布亚新几内亚人肠道微生物:组成,多样性及生态形成过程 (Cell Reports, IF: 8.358)
研究领域:肠道微生物
分析物种:细菌
高通量测序平台:Illumina MiSeq
测序区域:16S rRNA gene V5-V6 region
主要结果:
(1)PNG和US人群肠道微生物多样性分析
(2)细菌多样性图谱
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原文链接: http://www.cell.com/cell-reports/abstract/S2211-1247(15)00340-Xv
参考文献:
Martinez, I., J. C. Stegen, M. X. Maldonado-Gomez, A. M. Eren, P. M. Siba, A. R. Greenhill and J. Walter (2015). “The gut microbiota of rural papua new guineans: composition, diversity patterns, and ecological processes.” Cell Rep 11(4): 527-538.