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1. 总RNA提取与质检2. 已知序列的验证3. 合成5'和3' RACE-ready cDNA第一链；通过LD-PCR分别进行5' 和3' RACE4. 基因未知序列验证

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可一次性提取5-200ug的质粒，并通过测定OD值检测质粒纯度。

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密码子优化，指的是利用偏爱密码子（Preferred codons)，即避免利用率低的或稀有密码子，简化基因转录后的mRNA的二级结构，去除不利于高效表达的模体（Motif），加入有利于高效表达的模体，调整GC含量等这些方法重新设计基因。基因合成的商业化大大推动了密码子优化的适

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服务内容相对定量：以5S rRNA或U6为内参，检测样本中miRNA相关的相对表达量。 绝对定量：标准品作标准曲线，通过标准曲线对样品miRNA进行相关绝对定量检测。

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运用SigmaFit算法为未知物的鉴定提准确质量和真实同位素分布模式。运用SmartFormula软件可以推算出化合物的确切分子量。

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甲基化特异性的PCR是一种灵敏度高且操作相对简单的甲基化研究方法。重亚硫酸盐处理DNA后，基因组DNA发生的由甲基化状态决定的序列改变。随后进行引物特异性的PCR。该方法引物设计是关键。MSP中设计两

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