selleck产品在文献中的引用:     
    
   
Carcinogenesis,   2010, 31(11):1948-55
  
  
   
Biochem Pharmacol, 2011, 82(10):1457-66
  
  
   
Int J Proteomics, 2011, 2011:215496
  
  
   
Mol Cancer Ther, 2011, 10(10):1846-56
  
  
   
Cancer Lett, 2012, 316(1):77-84
  
客户使用selleck产品的实验数据:
     更多详情请访问中国唯一官方网站www.selleck.cn/products/Lapatinib-Ditosylate.html   
生物活性
产品描述
Lapatinib (GW-572016) Ditosylate是一种有效的EGFR和ErbB2抑制剂，IC50分别为10.8和9.2 nM。
靶点
EGFR
ErbB2
 
 
 
 
IC50
10.8 nM
9.2 nM [1]
 
 
 
 
体外研究
Lapatinib 微弱抑制ErbB4活性，IC50为367 nM, 作用于EGFR和 ErbB2 比作用于其他激酶，如c-Src, c-Raf, MEK, ERK, c-Fms, CDK1, CDK2, p38, Tie-2,和 VEGFR-2选择性高300多倍。Lapatinib作用于HN5细胞时，显著抑制受体EGFR 和 ErbB2自磷酸化，这种作用存在剂量依赖性，IC50分别为170 nM和80 nM,而作用于BT474细胞时，IC50分别为210 nM 和 60 nM。与OSI-774和Iressa(ZD1839)优先抑制过量表达EGFR细胞生长不同, Lapatinib 抑制过量表达EGFR和ErbB2细胞生长。 作用于过量表达EGFR或 ErbB2的细胞具有高抑制活性，IC50为0.09-0.21 μM,而作用于表达低水平EGFR或ErbB2的细胞，IC50为3-12 μM,比作用于正常纤维细胞选择性高100倍。Lapatinib有效抑制过量表达EGFR的HN5和A-431细胞生长，也抑制过量表达ErbB2的BT474和N87细胞生长，且显著诱导HN5细胞周期停在G1期，也诱导 BT474 细胞凋亡，与抑制AKT磷酸化相关。[1] Lapatinib 作用于含EGFR的L858R和T790M突变的抗Gefitinib的H1975细胞显著抑制Stat3磷酸化，导致细胞生长受抑制，IC50为1-2 μM。[3]
体内研究
Lapatinib 按~100 mg/kg剂量口服处理，每天两次，显著抑制BT474和HN5移植瘤生长，这种作用存在剂量依赖性。[1] 与在体外活性一致，Lapatinib按100-150 mg/kg剂量处理携带H1975肿瘤的小鼠，延迟肿瘤生长。[3]
特征
 
推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)
激酶实验: [1]
体外激酶实验
通过测量抑制肽底物磷酸化的情况而获得抑制酶活性的IC50值。通过杆状病毒表达系统纯化EGFR 和 ErbB2的细胞外激酶域。在96孔圆底板上进行EGFR和ErbB2反应，终体积为45 μL。反应混合物含50 mM 4-吗啉丙磺酸(pH 7.5), 2 mM MnCl2, 10 μM ATP, 1 μCi [γ33P] ATP/每次反应, 50 μM 肽 A [生物素-(氨基)-EEEEYFELVAKKK-CONH2], 1 mM 二流苏糖醇，及 1 μL DMSO（含连续稀释的Lapatinib，起始浓度为10 μM）。加入指定纯化的 1型受体胞内域，开始反应。加入的酶量为为1 pmol/每组反应(20 nM)在23oC下反应10分钟，加入45 μL 0.5%溶于水的磷酸，终止反应。终止反应混合物(75 μL) 转移到磷酸纤维过滤板上。板过滤，然后使用200 μL 0.5% 磷酸冲洗3次。每孔加入闪烁剂(50 μL) , 在Packard Topcount上测量每组反应。通过10点剂量反应曲线获得IC50值。
细胞试验: [1]
细胞系
HFF, MCF-7, T47D, A-431, HN5, BT474, N87, CaLu-3, HB4a, 和 HB4a c5.2
浓度
溶于 DMSO,终浓度为~100 μM
处理时间
72小时
方法
使用不同浓度Lapatinib处理细胞72小时。使用亚甲基蓝染色测定相对细胞数。使用Spectra酶标仪在620 nm 处测定吸光值。通过碘化丙啶染色和渗透BrdUrd的抗体检测，测量细胞死亡和细胞周期分析。
动物实验: [1]
动物模型
皮下移植HN5细胞的CD-1雌性裸鼠,皮下移植BT474细胞的 C.B-17 SCID 雌性小鼠
配制
在磺丁基醚-β-环糊精10% 水溶液(CD10)中配制
剂量
~100 mg/kg
给药处理
口服处理，每天两次
溶解度
15% Captisol, 5 mg/mL