Product Information

Transformation of plasmid DNA to competent E. Coli cells

1. Thaw competent cells on ice. 20–200µL per tube
2. Add max. 1-3µL of plasmid
3. Mix very gently!
4. Incubate the tubes on ice for 30 min
5. Heat shock the cells for 45 sec to 2 min at 42°C
6. Place the tubes immediately on ice for at least 2 min
7. Add 800µL of SOC medium to each tube
8. Incubate for 1 hour at 37°C and shake vigorously
9. Spin down briefly and remove most supernatants
10. Resuspend cell pellet with the rest SOC medium in the tube by pipetting
11. Plate out the suspension on a LB agar plate containing the appropriate antibiotic. Incubate the plates overnight at 37°C

载体说明：

是一种具有基因高效转移能力的逆转录病毒载体。将载体转染到适当的包装细胞系中，可以表达瞬时或稳定的转录产物，其中包含病毒包装信号(ψ)、目的基因和选择标记。
该载体包含LTR和Ψ(病毒包装信号)，无复制和形成病毒颗粒所必需的结构基因(gag, pol和env)，而且5’-LTR的U3区域被替换成HCMV IE promoter，同时还具有选择标记新霉素抗性基因。当插入目的基因后，利用该载体转录，产生的病毒滴度是普通逆转录病毒载体的2-8倍。
该产品是在Dr. S.Kim 开发的载体pDON-AI DNA基础上改造的。