产品简介

支原体（Mycoplasma）是一种没有细胞壁的原核生物，大小约0.1 - 0.6微米。目前，已发现的支原体品种有100多种。 由于支原体直径较小，经常可以穿过实验室常规的0.20微米孔径的除菌滤膜，高压过滤时，甚至可以穿过0.10微米孔径的除菌滤膜，造成细胞的支原体污染。本公司开发的支原体清除试剂Ⅰ含有抑制支原体蛋白质合成的药物，而支原体清除试剂Ⅱ含有抑制支原体DNA合成的药物。由于两种试剂的作用机理不同，支原体清除试剂Ⅰ需要处理不少于15天，而支原体清除试剂Ⅱ只需处理7天。两者都可以达到永久杀灭和清除支原体的目的。大约5-10%的支原体会对Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ或Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ产生抗性，此外，也有3-5%左右的细胞会在杀灭支原体的过程中死亡，由于上述两个原因，我们一般建议同时购买两种支原体清除试剂，如果发现细胞被污染，可以将细胞分成两份，分别用Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ和Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ同时进行杀灭，这样支原体对两种药物同时产生抗性和处理过程中细胞同时死亡的概率会非常低。

试剂盒组成

Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ              1.0 mL (1000×)

       Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ              1.0 mL (1000×)

运输和储存

      常温运输，-20 ℃保存，可以保存2年。

使用方法

（一）Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ

1. 使用之前，先将Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ用PBS或者无血清培养液稀释10倍后，放4℃冰箱保存。

2. 将50-100万个细胞铺到60 mm的细胞培养皿内，加入4 mL含Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ的正常细胞培养液（使用稀释10倍后的Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ，按1:100比例加入）。

3. 每2-3天更换细胞培养液，加入新鲜的含Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ的正常细胞培养液。期间如果细胞密度过大，请保持细胞密度适当（贴壁细胞可能需要胰酶消化），并更换新的培养皿。

4. 处理15天后，可以用支原体检测试剂盒进行检测，检测支原体是否杀灭完全。如果仍有支原体残留，可以考虑再处理6天。

5. 以后每隔1个月进行支原体的常规检测，以保证没有新的支原体污染。

（二）Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ

1. 使用之前，先将Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ（注意：支原体清除试剂Ⅱ在-20 ℃保存后，解冻时可能会有细小的结晶析出）用PBS或者无血清培养液稀释10倍后，（支原体清除试剂Ⅱ可以彻底溶解，放4℃冰箱保存。

2. 将50-100万个细胞铺到60 mm的细胞培养皿内，加入4 mL含Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ的正常细胞培养液（使用稀释10倍后的Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ，按1:100比例加入）。

3. 每天更换细胞培养液，加入新鲜的含Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ的正常细胞培养液。期间如果细胞密度过大，请保持细胞密度适当（贴壁细胞可能需要胰酶消化），并更换新的培养皿。

4. 处理7天后，可以用支原体检测试剂盒进行检测，检测支原体是否杀灭完全。如果仍有支原体残留，可以考虑再处理3天。

5. 以后每隔1个月进行支原体的常规检测，以保证没有新的支原体污染。

注意事项

      1. 建议将细胞分成两份，分别用Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ和Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ同时进行杀灭，这样支原体对两种药物同时产生抗性和处理过程中细胞同时死亡的概率会非常低。如果单独使用一种清除试剂的话，万一发现细胞对其中一种清除试剂有抗性或者细胞在处理过程中死亡，又要再花7-15天的时间尝试另外一种清除试剂的效果。

      2. 处理过程中，注意每天观察细胞的状况，如果发现支原体清除试剂对细胞的毒性较大，可以加大培养液中的血清浓度或者提高细胞的密度。

      3. Quick Cell支原体清除试剂Ⅰ和Quick Cell支原体清除试剂Ⅱ在降低浓度后（使用稀释10倍后的Quick Cell支原体支原体清除试剂Ⅰ或者Ⅱ，按1:500比例加入）也可以加入到培养液中作为短期（1-2个月）的支原体污染预防药物，但是不建议在细胞培养液中长期（超过2个月）加入，因为有可能导致对该两种药物有抗性的支原体出现。

Quick Cell支原体清除试剂的效果图：左侧为未经支原体清除试剂处理的人Hela细胞,经DAPI染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色，这些处于细胞质的核酸物质就是支原体DNA。而右侧为经过本公司的支原体清除试剂Ⅱ处理7天的Hela细胞，经DAPI染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质没有任何絮状核酸物质被染成蓝色，说明支原体已经被清除。