细菌 DNA 快速提取试剂盒

Col-D0401

试剂盒应用

本试剂盒针对细菌特征开发的裂解液 DBB 能够在 10 分钟内将细菌裂解，10 分钟内完成细菌的提取

和纯化。提取的基因组 DNA 完整性好，适合 PCR、qPCR、酶切、克隆、Southern 杂交、文库构建

等。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。

使用方法

1. 细菌培养液 1-5mL，12,000rpm 离心 1 分钟，弃培养液。

2. 加入 200μL 溶菌缓冲液 TE，混匀后加入 10μL 溶菌酶，37℃孵育 5 分钟。

3. 加入 600μL 裂解液 DBB 和 10μL 蛋白酶 K，充分混匀，55℃孵育 5 分钟。

备注：如果基因组 DNA 含量未达预期，可适当延长孵育时间至 30 分钟。

4. 12,000rpm 离心 1 分钟。取 700μL 上清。

5.（选做）加入 5μL RNase A（10mg/mL），室温静置 5-10 分钟。

6. 加入 350μL 无水乙醇，充分混匀。

7. 全部加入 DNA 纯化柱中，12,000rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中废液。

8. 向 DNA 纯化柱中加入 500μL 洗涤液 WB1，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。

9. 向 DNA 纯化柱中加入 500μL 洗涤液 WB2，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。

10. 重复步骤 9 一次。

11. 12,000rpm 离心 2 分钟，倒掉收集管中废液。

12. 将 DNA 纯化柱放入无 DNase 无 RNase 离心管中，加入 30-50μL 洗脱液 BB，室温放置 1 分钟。

13. 12,000rpm 离心 2 分钟，得到 DNA 溶液，-80℃保存。

注意事项

1. 经常更换手套，防止 DNA 污染。

2. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管，防止 DNA 降解。

3. 常更换吸头，防止交叉污染。

4. 动作轻柔，防止基因组 DNA 断裂。

5. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液 BB 置于 65℃水浴后再使用。