Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES
产品名称： Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES
英文名称： Hieff  NGSTM OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina
产品编号： 12203ES08
产品价格： 0
产品产地： Yeasen
品牌商标： Yeasen
更新时间： 2023-08-17T13:40:59
使用范围： null
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
- 二维码 : 点击查看
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®
“一步法”DNA建库试剂盒
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®
“一步法”DNA建库试剂盒
产品信息
产品编号
规格
价格（元）
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®
“一步法”DNA建库试剂盒
12203ES08
8 T
3683.00
12203ES24
24 T
7583.00
12203ES96
96 T
28663.00
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产品编号 |
规格 |
价格（元） |
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Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒 |
12203ES08 |
8 T |
3683.00 |
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12203ES24 |
24 T |
7583.00 |
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12203ES96 |
96 T |
28663.00 |
产品描述
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台专业开发设计的新一代酶切法建库试剂盒。与传统的建库法比较，本品采用高质量的片段化酶，摆脱了繁琐的超声过程，同时简化了操作流程，将片段化模块与末端修复模块合二为一，极大的降低了建库的时间和成本。本试剂盒具有优秀的文库转化率，可应用于常规动植物基因组、微生物基因组等样本，同时能兼容FFPE DNA样本的建库。经测序验证，不同GC含量的样本，均可获得优异的测序结果，文库覆盖度高，均一性好，偏好性低，使建库变得更加简单高效。
Ø 适用500 pg-1 μg的基因组DNA、全长cDNA等样本
Ø 高质量片段化酶，可随机切割双链DNA，酶切片段无偏好性
Ø 片段化、末端修复/加A一步完成
Ø 强扩增效率的高保真酶，显著提高文库质量及产量
Ø 适用于FFPE DNA样本
Ø 严格的批次性能与稳定性质控
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台专业开发设计的新一代酶切法建库试剂盒。与传统的建库法比较，本品采用高质量的片段化酶，摆脱了繁琐的超声过程，同时简化了操作流程，将片段化模块与末端修复模块合二为一，极大的降低了建库的时间和成本。本试剂盒具有优秀的文库转化率，可应用于常规动植物基因组、微生物基因组等样本，同时能兼容FFPE DNA样本的建库。经测序验证，不同GC含量的样本，均可获得优异的测序结果，文库覆盖度高，均一性好，偏好性低，使建库变得更加简单高效。
Ø 适用500 pg-1 μg的基因组DNA、全长cDNA等样本
Ø 高质量片段化酶，可随机切割双链DNA，酶切片段无偏好性
Ø 片段化、末端修复/加A一步完成
Ø 强扩增效率的高保真酶，显著提高文库质量及产量
Ø 适用于FFPE DNA样本
Ø 严格的批次性能与稳定性质控
产品组分
组分编号与名称
12203ES08
12203ES24
12203ES96
12203-A
Smearase® Mix
80 μL
240 μL
960 μL
12203-B
Ligation Enhancer
240 μL
720 μL
4×720 μL
12203-C
Fast T4 DNA Ligase
40 μL
120 μL
480 μL
12203-D
2×Super Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix
200 μL
600 μL
4×600 μL
12203-E
Primer Mix
40 μL
120 μL
480 μL
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组分编号与名称 |
12203ES08 |
12203ES24 |
12203ES96 |
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12203-A |
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Smearase® Mix |
80 μL |
240 μL |
960 μL |
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12203-B |
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Ligation Enhancer |
240 μL |
720 μL |
4×720 μL |
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12203-C |
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Fast T4 DNA Ligase |
40 μL |
120 μL |
480 μL |
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12203-D |
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2×Super Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix |
200 μL |
600 μL |
4×600 μL |
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12203-E |
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Primer Mix |
40 μL |
120 μL |
480 μL |
运输与保存方法
冰袋运输。所有组分-20°C保存，有效期1年。
冰袋运输。所有组分-20°C保存，有效期1年。
注意事项
一、关于操作
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。
3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。
4. 为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。
5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。
6. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染，进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离；使用专用的移液器等设备；并定时对各实验区域进行清洁（使用0.5%次**钠或10%漂白剂进行擦拭清理），以保证实验环境的洁净度。
二、关于DNA片段化
1. 本试剂盒兼容范围为500 pg – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA。
2. 若Input DNA中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐，可能会影响后续实验，建议将DNA稀释在ddH2O或不含EDTA的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化。
3. 对于常规的高质量基因组DNA，酶切时间参考表5，本试剂盒片段化偏好低，耐受各种GC含量的模板。对于不同降解程度的FFPE样本，酶切时间参考表6。以上为推荐时间，需客户在自己的实验体系中进行微调，以达到最佳效果。
4.为保证优质精确的片段化效果，片段化反应配制过程请于冰上操作。
5. 针对FFPE DNA建库，若样本质量不佳，客户对当前建库产量不满意，可选购我公司的FFPE DNA Repair Reagent (Cat#12606)对FFPE DNA进行修复，具体使用方法可参考此产品说明书。该试剂可与片段化末修加A过程同时进行，无需额外的操作。
三、关于接头连接（Adapter Ligation）
1. 针对Illumina®测序平台，Yeasen提供48种Barcoded Adapters: Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1~Set 4（Cat#12615~Cat#12618）；单端 96种 Index Primers: Hieff NGS® 96 Single Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 （Cat#12611~Cat#12612）；双端 384 种 Index Primers: Hieff NGS® 384 Dual Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 （Cat#12613~Cat#12614）。
2. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer；用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表1列举了使用本试剂盒，不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。
表1 500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度
Input DNA
Adapter : Input DNA摩尔比
Input DNA
Adapter : Input DNA摩尔比
1 μg
10:1
50 ng
100:1
500 ng
20:1
一、关于操作
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。
3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。
4. 为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。
5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。
6. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染，进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离；使用专用的移液器等设备；并定时对各实验区域进行清洁（使用0.5%次**钠或10%漂白剂进行擦拭清理），以保证实验环境的洁净度。
二、关于DNA片段化
1. 本试剂盒兼容范围为500 pg – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA。
2. 若Input DNA中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐，可能会影响后续实验，建议将DNA稀释在ddH2O或不含EDTA的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化。
3. 对于常规的高质量基因组DNA，酶切时间参考表5，本试剂盒片段化偏好低，耐受各种GC含量的模板。对于不同降解程度的FFPE样本，酶切时间参考表6。以上为推荐时间，需客户在自己的实验体系中进行微调，以达到最佳效果。
4.为保证优质精确的片段化效果，片段化反应配制过程请于冰上操作。
5. 针对FFPE DNA建库，若样本质量不佳，客户对当前建库产量不满意，可选购我公司的FFPE DNA Repair Reagent (Cat#12606)对FFPE DNA进行修复，具体使用方法可参考此产品说明书。该试剂可与片段化末修加A过程同时进行，无需额外的操作。
三、关于接头连接（Adapter Ligation）
1. 针对Illumina®测序平台，Yeasen提供48种Barcoded Adapters: Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1~Set 4（Cat#12615~Cat#12618）；单端 96种 Index Primers: Hieff NGS® 96 Single Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 （Cat#12611~Cat#12612）；双端 384 种 Index Primers: Hieff NGS® 384 Dual Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 （Cat#12613~Cat#12614）。
2. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer；用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表1列举了使用本试剂盒，不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。
表1 500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度
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Input DNA |
Adapter : Input DNA摩尔比 |
Input DNA |
Adapter : Input DNA摩尔比 |
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1 μg |
10:1 |
50 ng |
100:1 |
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500 ng |
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