PspPPI
产品名称: PspPPI
英文名称: PspPPI
产品编号: HZ600366
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: HZbscience
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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PspPPI
附带条件
附带条件
为了获得100%的活性,BSA应该加入到1X反应混合物中,最终浓度为100μg/ml。不使用BSA进行长期培养。
附带条件
单位定义的酶的一个单位是水解1μgλDNA(DCM,HydiIII消化)1小时在37℃下的总反应体积为50μl所需的量。
识别位点RGGWCCY
来源假单胞菌属PP
LAMBDA DNA(DCM,HydiIII消化)测定
最优缓冲区Y?(33毫米醋酸三乙酯(pH为7.9,在25°C);10毫米醋酸镁;66毫米醋酸钾;1毫米DTT)。
最佳温度37°C
贮藏条件为10 mM TrI HCl(pH 7.5);200 mM NaCl;0.1 mM EDTA;7 mM 2-巯基乙醇;200μg/ml牛血清白蛋白;50%甘油。
5倍以上的酶消化后,结扎超过70%的DN**段可以结扎,超过80%的这些可以被剪除。
在37℃下,用1μgλDNA和5μA酶孵育16小时后,检测到非特异性Hyrasists无非特异性的活性。
重叠DCM甲基化(CMCWGG)阻断的甲基化效应:RGGWCCTGG。
在65℃下孵育20分钟,使失活酶失活。
Campatible Ends PpuMI,PSP5II
使用说明
To obtain 100% activity, BSA should be added to the 1x reaction mix to a final concentration of 100 μg/ml. Do not use BSA for long incubation.?
技术规格
Unit definition | One unit of the enzyme is the amount required to hydrolyze 1 μg of Lambda DNA (dcm-, HindIII-digest) in 1 hour at 37°C in a total reaction volume of 50 μl. |
Recognition sites | RG↑GWCCY |
Source | Pseudomonas species PP |
Assayed on | Lambda DNA (dcm-, HindIII-digest) |
Optimal buffer | Y?(33 mM Tris-acetate (pH 7.9 at 25°C); 10 mM magnesium acetate; 66 mM potassium acetate; 1 mM DTT.) |
Optimal temperature | 37°C |
Storage conditions | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-mercaptoethanol; 200 μg/ml BSA; 50% glycerol.|Store at -20°C.? |
Ligations | After 5-fold overdigestion with enzyme more than 70% of the DNA fragments can be ligated and more than 80% of these can be recut. |
Non-specific hydrolisis | No nonspecific activity was detected after incubation of 1 μg of Lambda DNA with 5 u.a. of enzyme for 16 hours at 37°C. |
Methlation effect | Blocked by overlapping Dcm methylation(CmCWGG):RGGWCCTGG. |
Thermal inactivation | enzyme is inactivated by incubation at 65°C for 20 mins. |
Campatible Ends | PpuMI, Psp5II |