AclWI
产品名称: AclWI
英文名称: AclWI
产品编号: HZ600322
产品价格: 0
产品产地: 中国/上海
品牌商标: HZbscience
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
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AclWI
附带条件
附带条件
为了获得100%的活性,BSA应该加入到1X反应混合物中,最终浓度为100μg/ml。
附带条件
酶的一个单位是在37℃的1小时内,在50μL的总反应体积中水解1μgλDNA(DAM-)所需的量。
识别位点GGATC(n)4
源Acinetobacter calcoaceticus W2131
对λDNA(DAM-)的测定
最佳缓冲液Y(33毫米醋酸三乙酯(pH为7.9℃,25℃);10毫米醋酸镁;66毫米醋酸钾;1毫米DTT)+BSA。
最佳温度37°C
贮藏条件为10 mM TrI HCl(pH 7.5);100 mM氯化钾;0.1 mM EDTA;7 mM 2-巯基乙醇;200μg/ml牛血清白蛋白;50%甘油;在-20℃储存。
用DNA约50%的DN**段进行2倍消化后的结扎可以用超过500 U.A的DNA连接酶连接。
在37℃下,用1μgλDNA和6μA酶孵育16小时后,检测到非特异性Hyrasists无非特异性的活性。
大坝甲基化(GMATC)GATATC阻断的甲基化效应
在65℃下孵育20分钟,使失活酶失活。
Campatible Ends AlwI,BinI,BspPI,N.AlWi ^
使用说明
To obtain 100% activity, BSA should be added to the 1x reaction mix to a final concentration of 100 μg/ml. Do not use BSA for long incubation.
技术规格
Unit definition | One unit of the enzyme is the amount required to hydrolyze 1 μg of Lambda DNA (dam-) in 1 hour at 37°C in a total reaction volume of 50 μl. |
Recognition sites | GGATC(N)4↑ |
Source | Acinetobacter calcoaceticus W2131 |
Assayed on | Lambda DNA (dam-) |
Optimal buffer | Y (33 mM Tris-acetate (pH 7.9 at 25°C); 10 mM magnesium acetate; 66 mM potassium acetate; 1 mM DTT.) + BSA |
Optimal temperature | 37°C |
Storage conditions | 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-mercaptoethanol; 200 μg/ml BSA; 50% glycerol; Store at -20°C. |
Ligations | After 2-fold overdigestion with enzyme about 50% of the DNA fragments can be ligated with more than 500 u.a. of DNA ligase. |
Non-specific hydrolisis | No nonspecific activity was detected after incubation of 1 μg of Lambda DNA with 6 u.a. of enzyme for 16 hours at 37°C. |
Methlation effect | Blocked by Dam methylation (GmATC) GGATC |
Thermal inactivation | enzyme is inactivated by incubation at 65°C for 20 mins. |
Campatible Ends | AlwI, BinI , BspPI, Nt.AlwI^ |