C41(DE3) pLysS感受态细胞
产品名称： C41(DE3) pLysS感受态细胞
英文名称： C41(DE3) pLysS
产品编号： GST-008A
产品价格： 0
产品产地： 长沙
品牌商标： axybio
更新时间： null
使用范围： null
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感受态细胞称: |
C41(DE3)pLysS |
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菌株类型: |
E.coli |
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货号: |
GST-008A |
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培养基: |
LB培养基 |
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生长条件: |
37 ℃, 有氧 |
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基因型: |
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抗性: |
氯霉素 |
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质粒转化条件: |
42 ℃热激 |
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应用: |
蛋白表达 |
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诱导方法: |
IPTG |
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菌株特点: |
过表达C41(DE3), C41(DE3) pLysS, C43(DE3), and C43(DE3) pLysS感受态细胞宿主菌能够有效表达来源于各个物种包括细菌，酵母，植物，病毒和动物等多个物种的有毒蛋白。
该系列宿主菌基因中含有突变，可以包容有毒蛋白的表达。C41(DE3)来源于BL21(DE3)。该宿主菌含有一个基因突变，能够降低T7 RNAP的酶活力，所以能够阻止过表达重组表达有毒蛋白的细胞死亡。 正如标准的BL21(DE3)菌株，过表达菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), 和C43(DE3)pLysS是λDE3的溶源性菌株。这些菌株在lacUV5启动子的下游含有一个T7 RNA聚合酶基因。这些宿主菌适合于表达克隆于T7启动子表达载体上的基因。过表达菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), 和C43(DE3)pLysS在lon和ompT蛋白酶的缺陷上是不同的。
请注意的是，该过表达系列宿主菌的蛋白表达量与BL21(DE3)相比要稍低。 |
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使用方法:
（1）取出感受态细胞，手心融化感受态或者置于冰上5min解冻。
（2）然后将连接产物10ul加入感受态中（100ul），轻弹感受态离心管底部，混匀，冰浴30min。
（3）42℃水浴热激90S，之后再冰浴5min。
（4）取出离心管（感受态），吸水纸吸去离心管外壁水分，室温放置10min。
（5）每管中加900μl LB(或SOC)培养基(不含抗生素)，37℃振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
（6）室温4,500rpm离心5分钟，弃去900μl上清后，用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含抗性的的LB琼脂平板。
（7）将平板置于室温直至液体被吸收。
（8）倒置平皿，于37℃培养，12~16小时后可出现菌落。