大鼠主动脉平滑肌细胞
货号：XXX
细胞介绍
血管疾病发生和发展的一个主要因素是由于血管平滑肌细胞（smooth muscle cells, SMCs）转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道，ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应，并进一步造成血管疾病的原因 。因此，对血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管疾病的靶向治疗方法。
细胞特性
1） 来源：1-3天SD大鼠主动脉
2） 含量：>5x105 个/mL
3） 鉴定：α-smooth muscle actin（α-SMA）特异性抗体免疫荧光法（见图片1）
4） 纯度：>90%
5） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
6） 规格：1mL冻存管包装
运输和保存：干冰运输，收到后立即液氮冻存。
细胞使用：仅供科研使用。
                                 大鼠主动脉平滑肌细胞
货号：XXX
细胞培养步骤
1） 准备完全培养基：DMEM培养基(GIBCO，货号11995-065)，90%；胎牛血清，10%，P/S。
2） 培养瓶包被：在T-75细胞培养瓶中加入10mL无菌去离子水，然后加入15μL 10mg/mL的Poly-L-Lysine溶液（推荐2μg/cm2包被浓度），在370C培养箱中反应过夜（或至少一小时）。
3） 用无菌去离子水洗涤两遍包被好的培养瓶，加入15mL完全培养基待用。
4） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在370C水浴中迅速振荡解冻，加入4mL 完全培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养液后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含有15mL完全培养基的培养瓶中隔夜贴壁培养。第二天换液并检查细胞密度。
5） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，既可进行传代培养：
1. 弃去培养液，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，放于37℃培养箱中反应1-2分钟，然后在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含10mL完全培养基的Poly-L-Lysine包被的培养瓶中。
注意事项： 
1. 收到细胞后，若发现冻存管瓶盖脱落、破损或已融化及细胞有污染，请及时与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
赛百慷（上海）生物技术股份有限公司
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