成都昱强科技有限公司
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❀实验流程
1. 构建敲除 /shRNA/ 过表达病毒质粒;
2. 跟病毒质粒系统中另外 2 个质粒,一起电转 293T 细胞,包装病毒;
3. 离心收集病毒;
4. 病毒浓缩纯化,发货前质量检测;
5. 侵染靶细胞,混合克隆检测;
6. 单克隆筛选及验证。
慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于:
1. 非常难转染的细胞,例如神经元细胞、原代细胞、干细胞、肿瘤细胞等,针对这类细胞慢病毒载体的转染效率接近100%;
2. 构建稳定表达或者沉默特定基因的单克隆细胞株;
3. 活体动物模型(in vivo)的基因操作;
4. 可调控表达,经过特定的元件修饰的慢病毒表达载体,可实现只有在特定的外源或内源物质的作用下才能产生表达,从而调控目的基因的定时、定量表达。