组织及血液酸性磷酸酶测定试剂盒 微量法
产品名称: 组织及血液酸性磷酸酶测定试剂盒 微量法
英文名称: Micro Tissue and Blood Acid Phosphatase(ACP)Assay Kit
产品编号: BC2135
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2023-08-11T10:26:26
使用范围: null
- 联系人 : 索莱宝-龚思雨
- 地址 : 北京市通州区中关村科技园区通州园金桥科技产业基地景盛南四街15号85A三层
- 邮编 : 101102
- 所在区域 : 北京
- 电话 : 178****1073 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : 3193328036@qq.com
- 二维码 : 点击查看
产品内容:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体30mL×1瓶,4℃避光保存,变成蓝绿色不能使用。
标准品:液体1mL×1支,1μmol/mL酚标准液,4℃保存。
产品说明:
ACP在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP常用于前列腺癌的辅助诊断。
在酸性环境中,ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚,苯酚与4-氨基安替和铁*化钾反应生成红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通过测定510nm吸光度增加速率,来计算ACP活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、 粗酶液提取:
称取约0.1g组织,加提取液1mL充分研磨,4℃、10000rpm离心10min,取上清液待测。血液可直接用于测定,如果浓度高的话,用提取液稀释。
二、 测定操作:
1.分光光度计预热30 min以上,调节波长到510 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂一置于37℃水浴中预热30 min以上。
试剂名称(μL)
测定管
对照管
空白管
标准管
蒸馏水
-
-
20
-
1μmol/mL标准品
-
-
-
20
上清液
20
-
-
-
试剂一
40
40
40
40
试剂二
40
40
40
40
混匀后置于37℃水浴中保温15min
试剂三
120
120
120
120
上清液
-
20
-
-
混匀后于510 nm测定吸光度,分别记为A测定管、A对照管、A空白管、A标准管。
三、ACP活性计算:
1.按蛋白浓度计算
活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1 μmol酚。
ACP(U/mg pr)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T
=0.033×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr
2.按样本鲜重计算
活性单位定义:37℃中每克组织每分钟催化产生1 μmol酚。
ACP活力(U/g)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷(W÷V提取×V样)÷T
=0.033×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W
3.血液中ACP活性计算
活性单位定义:37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚。
ACP活力(U)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷V样÷T
=0.033×(A测定管-A对照管)÷(A