Vaccinia Capping Enzyme
牛痘病毒加帽酶
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
Vaccinia Capping Enzyme牛痘病毒加帽酶
10615ES76
500 U
1256.00
Vaccinia Capping Enzyme牛痘病毒加帽酶
10615ES84
2000 U
3856.00
Vaccinia Capping Enzyme牛痘病毒加帽酶
10615ES92
10000 U
14856.00
产品描述
真核生物中mRNA经转录后修饰在5端形成一个特殊结构，即帽子结构，该结构对mRNA的稳定、转运与
翻译过程均有较重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶，其由D1和D12两个亚基组成，
兼具RNA三***酶活性、鸟苷酰基转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性，可将7-甲基鸟嘌呤帽结构
（m7Gppp）连接到RNA的5末端（m7Gppp5N）。牛痘病毒加帽酶，在合适浓度的加帽缓冲液（Capping
 buffer），鸟苷三磷酸（GTP），S-腺苷甲硫氨酸（SAM）等存在条件下，能够在一个小时之内对RNA进
行加帽，并且保证正确的方向。
本品以无菌液体形式提供，可应用于体内/体外翻译前mRNA的加帽反应或mRNA的5末端标记反应。
产品性质
来源（Source）
携带牛痘病毒加帽酶基因的E. coli
最适温度（Optimum Temperature）
37℃
储存缓冲液（Storage Buffer）
20 mM Tris-HCl pH 8.0，100 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，0.1% Triton X-100，50%甘油
活性单位定义（Unit Definition）
37℃条件下，1小时内将10 pmol GTP（α- 32P）掺入到一条含80个核苷酸（80 nt）转录产物上所需要的酶量，即为1个单位。
产品组分
组分编号
组分名称
产品编码/规格
10615ES76（500 U）
10615ES84（2000 U）
10615ES92（10000 U）
10615-A
10×Capping Buffer
150 μL
500 μL
1.25 mL×2
10615-B
Vaccinia Capping Enzyme（10 U/μL）
50 μL
200 μL
1 mL
运输和保存方法
冰袋运输，-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
2）所提取的RNA需经过纯化并使用无核酸酶的水重悬；
3）在加入酶之前需要对RNA溶液进行加热以去除5末端的二级结构；
4）对于已知5末端结构的RNA，可以延长反应时间至60分钟，提高加帽效率；
5）5末端标记反应体系中，GTP储液应稀释为反应体系中mRNA摩尔浓度的1-3倍。
 
使用方法
1. 加帽反应（反应体系20 μL）
本步骤适用于10 μg RNA（≥ 100 nt）的加帽反应，且可根据实验需要放大。
1）取10 μg RNA至1.5 mL离心管，使用无核酸酶的水稀释至15 μL；
2）65℃加热5分钟；
3）取出离心管置于冰上5分钟；
4）依次加入以下组分：
组分
体积
上述变性的RNA
15 μL
10×Capping Buffer
2.0 μL
GTP（10 mM）
1.0 μL
SAM（2 mM）
1.0 μL
Vaccinia Capping Enzyme（10 U/μL）
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