Cleascrip T7 RNA Polymerase (250 U/μL)
产品名称： Cleascrip T7 RNA Polymerase (250 U/μL)
英文名称： Cleascrip T7 RNA Polymerase (250 U/μL)
产品编号： 10628ES10
产品价格： 2438.00
产品产地： Yeasen
品牌商标： Yeasen
更新时间： 2024-07-19T08:49:09
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 10KU | 2438.0 |
| 100KU | 14645.0 |
| 250KU | 21965.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
本产品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体 T7 RNA 聚合酶，是对野生型T7进行了改造优化，突变得到的可以大幅度降低dsRNA含量的T7 RNA 聚合酶。以含有 T7 启动子序列的双链 DNA 为模板，以 NTP 为底物，合成与启动子下游的反向单链 DNA 互补的RNA。双链线性平末端或 5’突出末端 DNA均可作为 T7 RNA 聚合酶的底物模板，因此线性质粒、PCR 产物均可用作体外合成 RNA 的模板。 TM
产品性质
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来源 |
重组 E. coli |
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最适温度 |
37℃ |
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活性 |
250 U/μL |
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宿主核酸残留 |
<10 fg/U |
|
宿主蛋白残留 |
<50 ppm |
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RNA 酶残留 |
阴性 |
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储存缓冲液
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50mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油，pH7.9@25℃ |
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活性单位定义
|
在 37℃、pH8.0 的条件下，1 h 内使 1 nmol 的 [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为一个活性单位。 |
产品信息
|
货号 |
10628ES10 /10628ES60 /10628ES72 |
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规格 |
10 KU / 100 KU /250 KU |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
10628ES10 (10 KU) |
10628ES60 (100 KU) |
10628ES72 (250 KU) |
|
10628-A |
CleascripTM T7 RNA Polymerase (250 U/μL) |
40 μL |
400 μL |
1 mL |
|
10628-B |
10×Transcription Buffer |
500 μL |
1 mL×5 |
10 mL |
储存条件
-25 ~ -15℃保存，有效期1年。
使用说明
1．将所用实验材料从 -20℃拿出，置于冰盒上解冻，充分混匀，短暂离心收集液体于管底，置于冰上备用，
2. 反应体系配制:
2.1 普通转录体系
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
10×Transcription Buffer |
2 |
1× |
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CTP/GTP/ATP/UTP (100 mM each) |
2 each |
10 mM each |
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CleascripTM T7 RNA Polymerase (250 U/μL) |
1-1.6 |
- |
|
Murine RNase inhibitor (40 U/μL) |
0.5 |
- |
|
Pyrophosphatase,Inorganic (0.1U/μL) |
0.4 |
- |
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模板 DNA |
X (1μg) |
- |
|
RNase free H2O |
Up to 20 |
- |
2.2 共转录加帽体系
如果选择共转录法加帽，则按照下表配制共转录加帽体系：
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
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10×Transcription Buffer |
2 |
1× |
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CTP/GTP/ATP/UTP (100 mM each) |
2 each |
10 mM each |
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Cap1 帽子 (100 mM ) |
2 |
10 mM |
|
CleascripTM T7 RNA Polymerase (250 U/μL) |
1-1.6 |
- |
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Murine RNase inhibitor (40 U/μL) |
0.5 |
- |
|
Pyrophosphatase,Inorganic (0.1U/μL) |
0.4 |
- |
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模板 DNA |
X (1μg) |
- |
|
RNase free H2O |
Up to 20 |
- |
注： 1）若转录长度< 100 nt，模板投入量可增加至 2 μg，转录时间可增至4-8 h。
2）为了提高RNA质量，建议使用质粒线性化模板进行转录。
3）以上反应体系为推荐反应，NTP，帽子添加量，T7 RNA 聚合酶等均可根据实际情况进行适度调整。
4）20 μL转录体系，参考如上体系可获得 180-240μg 的RNA，若想获得更多的RNA，可等比例放大反应体系，不影响反应。
5）使用试剂、容器等无 RNase 污染。
3. 在 37℃下反应 2-3 h。
4. 反应结束后，加入 1μL DNase I（Cat #10611ES），在37℃反应15 -30 min 去除 DNA 模板。
5. 合成的RNA后续需进行纯化、质控，样品合格可用于后续实验。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240315