Bsu DNA聚合酶，大片段

中文名称：Bsu DNA聚合酶，大片段
英文名称：Bsu DNA Polymerase (Large Fragment)
产品规格：250U|2500U
Bsu DNA聚合酶是具有链置换活性的DNA恒温扩增聚合酶，主要应用于RPA重组酶扩增。重组酶UvsX与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链DNA中寻找同源序列；一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应，Bsu DNA聚合酶启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。

本产品为Bsu DNA聚合酶大片段，来源于嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus subtilis），系将Bacillus subtilis DNA聚合酶（Bsu） I基因的前296个AA截去而得。该酶保留了Bsu I的5′-3′聚合酶活性，但是缺失了5′-3′核酸外切酶结构域，该大片段自身缺失3′-5′核酸外切酶活性，可用于重组酶扩增。

产品组成：

保存温度：置于-20℃可保存2年，避免反复冻融。

产品应用：

• 随机引物法标记；
• cDNA第二条链的合成；
• 单个dA的加尾；
• 链置换的DNA合成。

活性定义：
在37℃条件下，30min内参入10nmol酸性不容物定义为1个活性单位。

1X Bsu Reaction Buffer：
50mM NaCl，10mM Tris-HCl (Ph7.5),10mM MgCl2,1mM DTT

酶储存液：
50mM Tris-HCl,50mM KCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,20% Glycerol,pH7.5。

热失活：
75℃，20min。

注意：

• 由于缺乏3-5核酸外切酶活性，Bsu DNA聚合酶，大片段不能切除3未配对的突出末端，因而不适用于生成平齐末端。
• 25℃时Bsu DNA聚合酶，大片段保留50%的活性，是同温度下Klenow片段（3-5exo-）的两倍。

性能测试：

按照如下体系配制反应：

混匀后95℃ 5min，然后冰上放置5min，分别加入不同剂量Bsu DNA聚合酶（泳道1-2：0，泳道3-4：0.5μl，泳道5-6：1μl，泳道7-8：2μl，泳道9-10：4μl，），分别在25℃和37℃孵育3h，电泳检测各组产物如下图
 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！