GelRed 是一种高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它可替代溴化乙锭（EB），并且远高于EB的灵敏度，同时不需要脱色。由于GelRed和EB有相同的光谱特性，因此用它替代EB时不需要更换成像系统。
GelRed既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高，并能排除染料对DNA迁移的干扰 。使用 GelRed进行电泳后染色，操作简单，不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在 0.1M NaCl 中，并将凝胶置于染色液中， 30 分钟后就可以观察。染色液在室温下极为稳定，可以多次反复使用。相比而言，预制凝胶由于不需要额外染色过程，因此染料用量更少，更为简单经济。
其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。
重要提示：
1、无 毒 性：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远小于EB。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。
2、灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
3、稳定性高： 可以使用微波炉加热，可以在室温下保存。
4、信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
5、操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
6、适用范围广：适用于预制凝胶（胶染法）和凝胶电泳后染色（泡染法）。
7、与标准凝胶成像系统完美兼容 ：使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时， GelRed 可以完美的替代 EB。
GelRed（10,000× 水溶液） 说明 GelRed 核酸染料特点 ● 无毒性： GelRed 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内， 艾姆斯氏试 验结果也表明，该染料的诱变性远远小于 EB。 ● 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I。 ● 稳定性高： 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中 极其稳定，耐光性强。 ● 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。 ● 操作简单： EB 一样， 与 在预制胶和电泳过程中染料不降解； 而电泳后染色过程也只需 30 分 钟且无需脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。 ● 适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法） ；适用于琼脂糖凝胶 或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。 ● 与 EB 有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置：标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片 都适用，使用与观察 EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在 300nm 紫外光附近可得到 最佳激发。 但是GelRed 不能被 488 nm 氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发， 因此不 推荐使用此类激发装置的成像系统。 GelRed 使用方法 1．胶染法（用法同 EB） （1）制胶时加入 GelRed 核酸染料（例如：每 50mL 琼脂糖溶液中加入 5μL GelRed 10,000 × 储液，以此比例类推） 。 （2）按照常规方法进行电泳。 注意事项： 此方法染色染料用量相对较少。500 μL 染料大约可以做 100 块 50mL 的胶。 由于 GelRed 具有良好的热稳定性， 可以在热的琼脂糖溶液中直接添加， 而不需要等待溶 液冷却。摇晃，振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将 GelRed 储液加到琼脂糖 粉末和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。GelRed 兼容 所有常用的电泳缓冲溶液。 含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备，并长期保存直到使用。 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。 2．泡染法 （1） 按照常规方法进行电泳。 （2） 用 H2O 将 GelRed 10,000× 储液稀释约 3,300 倍到 0.1M NaCl 中， 制成 3× 染色液。 （例 如将 15μL GelRed 10,000× 储液和 5mL 1M NaCl 加到 45mL H2O 中） 。 （3） 将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的 3× 染色液浸没 凝胶。室温振荡染色 30min 左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有 不同。对于含 3.5～10％丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于 30min 到 1h，并随丙烯酰胺含 量增加而延长。 注意事项： 用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用 3 次左右。 3× GelRed 染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。 如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。 如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的 凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。 几种核酸染料比较 名称 GelRed GelGreen SYBR Green I SYBR Green II Gold View I EB 灵敏度 高 高 极高 极高 低 低 稳定性 适用性 高 高 差 差 高 高 安全性 价格 通用大小片段电 美国安全认定无毒 中 泳染色 通用大小片段电 美国安全认定无毒 中 泳染色 100bp 以上片段电 花菁染料，低毒 泳染色 单链核酸分子电 花菁染料，低毒 泳染色 500bp 以上片段电 高毒性，强致癌 泳染色 100bp 以上片段电 强致癌，强诱变 泳染色 高 高 低 低 特别提醒： 如果您使用的是紫外成像仪，请选择 GelRed；如果您使用激光成像仪或希望在可见光下 观测，请选择 GelGreen 在极少数情况下，质粒经某些酶切后的 DNA 样品会出现拖尾和分辨率降低，此时建议同 时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。
