产品信息

    

        

            

            
产品名称
            
            

            
产品编号
            
            

            
规格
            
            

            
外观
            
            

            
储存
            
            

            
价格（元）
            
        
        

            

            
JC-1 线粒体膜电位荧光探针
            
            

            
40705ES03
            
            

            
1mg (5 mg/ml)
            
            

            
溶液
            
            

            
-20℃避光保存
            
            

            
615.00
            
        
        

            

            
JC-1 线粒体膜电位荧光探针
            
            

            
40705ES08
            
            

            
5mg
            
            

            
红褐色粉末
            
            

            
-20℃避光保存
            
            

            
2450.00
            
        
    

产品描述
JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内，可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内，JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物，聚合物发出强烈的红色荧光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失，JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中，产生绿色荧光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不仅可用于定性检测，因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测，因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时，只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
JC-1 用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为 1～20 μg/ml，对于很多细胞适宜采用的 JC-1浓度为 10 μg/ml。  
产品性质

    

        

            

            
化学名称
            
            

            
5,5‘,6,6’-Tetrachloro-1,1‘,3,3’-tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide
            
        
        

            

            
CAS No.
            
            

            
3520-43-2
            
            

            
分子式
            
            

            
C25H27Cl4IN4
            
        
        

            

            
分子量
            
            

            
652.23 
            
            

            
Ex (nm)
            
            

            
514
            
        
        

            

            
Em (nm)
            
            

            
529 
            
        
        

            

            
结构式
            
            

            

            
        
    

 

运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。
粉末-20℃干燥避光保存，至少一年有效。储存液分装成单次使用量，-20℃干燥避光保存，避免反复冻融，约一年有效。

使用方法
1. 工作液配制：
1）JC-1粉末（5 mg）：直接加1 ml DMSO到粉末内，室温颠倒混匀使其充分溶解，即得到5 mg/ml的储存液。溶液分装成小量储存于-20℃，避光干燥，避免反复冻融。
2）JC-1储存液（1mg in DMSO）：本品是JC-1的DMSO储存液，浓度为5 mg/ml。使用者需要根据单次用量来分装，-20℃避光干燥，避免反复冻融。
3）工作液配制：将冻存的储存液置于室温充分融化，之后用缓冲液或者预热的培养基直接稀释储存液（5 mg/ml）到需要的工作液浓度，边震荡边稀释，充分混匀。为了去除任何不溶颗粒，建议13,000 x g离心JC-1工作液1 min，小心吸取上清转移到新的管子内。整个过程要避光操作。注意：因JC-1不溶于水，很可能在稀释到工作液的过程中形成聚集颗粒，则建议细胞染色前用离心或者过滤的方法去除这些颗粒后再使用。
2. JC-1染色步骤（流式细胞仪）
1）     于6-，12或24-孔板上进行细胞铺板，密度为5×105 cells/ml。37℃，5%CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注：进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/ml，也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。
2）     取0.5 ml细胞悬液至无菌的离心管内；
3）     室温条件400 x g离心5 min；吸掉上清。
4）     用0.5 ml JC-1工作液重悬细胞，于37℃，5%CO2培养箱孵育15-30 min；注意：一般情况，15 min足以进行充分的染色。
5）     室温条件400 x g离心5 min；吸掉上清；
6）     用2 ml细胞培养液或者缓冲液重悬细胞，之后室温条件400 x g离心5 min；吸掉上清；
7）     重复步骤6）；
8）     用0.5 ml新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞，即可进行后续的流式分析。注意：请马上进行流式定量分析，此细节很重要。
数据分析：含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测；含有绿色JC-1单体的凋亡或不健康细胞用FL1(FITC)通道检测。
3. JC-1染色步骤（荧光显微镜）
A．    悬浮细胞
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