ClonaCell- TCS CHO 甲基纤维素培养基
产品名称: ClonaCell- TCS CHO 甲基纤维素培养基
英文名称: ClonaCell- TCS CHO medium
产品编号: 03815
产品价格: 0
产品产地: 加拿大STEMCELL公司
品牌商标: STEMCELL
更新时间: null
使用范围: null
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在许多实验室,基因转染技术被常规用于各种目的的研究。选择稳定的转染细胞是很重要的。通常采用的方法是将需要转染的基因与一个可以用于筛选的表型(如抗生素耐药)基因相连,之后进行细胞转染。转染后的细胞在含有适当抗生素的培养基中生长,具有耐药性的细胞会生长并被克隆。通常采用有限稀释法挑选需要的转染细胞。这种方法不但浪费时间,而且需要很多操作步骤。每一步都增加了污染的机会,并且在液体培养基中有些细胞克隆会过度生长,抑制了其它克隆的生长,这样就减少了得到最佳克隆的机会。为了解决上述问题,推荐使用ClonaCell®-TCS半固体培养基,筛选和克隆同时进行。
ClonaCell®-TCS是甲基纤维素培养基,可以用于同时筛选和克隆转染的非粘附细胞。在添加了适当抗生素的甲基纤维素培养基中,耐药的细胞会呈集落状生长,一至两周后用肉眼即可观察到,不需要再进行有限稀释和换液。过度生长的细胞也不会对其它克隆的生长造成影响。使用ClonaCell®-TCS得到一个细胞克隆的时间只是传统方法的一半。使用ClonaCell®-TCS可以有效地选择不同的淋巴和髓系细胞。也可根据需要选择是否添加抗生素的培养基(Hygromycin B或G418)。
优点:
快速:
l 14天即可得到单个细胞克隆
l 抗生素选择和克隆同时进行,比传统方法节约15天
l 培养期间不需换液
l 不需有限稀释
l 减少了需要筛选的数量
高效:
l 操作简便,减少了污染的机会
l 可以使非粘附细胞形成克隆
l 减少了某些克隆过度生长带来的负面影响
经济:
l 减少了试剂与耗材的使用
l 减少了操作人员至少30%的工作时间
使用传统的方法和ClonaCell®-TCS方法筛选基因转染的细胞需用时间比较
时间(天) |
有限稀释法 |
时间(天) |
ClonaCell®-HY |
1 |
转染细胞系 |
1 |
转染细胞系 |
1-2 |
恢复 |
1-2 |
恢复 |
7-14 |
挑选 |
7-14 |
挑选和克隆 |
4 |
扩增 |
4 |
收获转染细胞 |
1 |
筛选最佳克隆 |
1 |
筛选 |
>14 |
再克隆 |
|
扩增最佳克隆 |
1 |
再筛选 |
|
|
|
扩增最佳克隆 |
|
|
29-37 |
总天数 |
14-22 |
总天数 |