溴化*活化琼脂糖微球4FF/6FF是将溴化*键合在琼脂糖微球4FF/6FF上冻干的一种亲和色谱中间体。可用于偶联配体制备亲和色谱介质。
1.外观
本品为白色球状干粉,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
2.理化指标

项   目	指    标
活化基团	溴化*
基   质	高流速4%/6%琼脂糖微球
颗粒形状及大小	球形 ， 50~160 μm（溶胀后）
键合量	13~26mg胰蛋白酶原/ ml胶
最高流速	250/300cm/h*
耐压	0.15/0.2MPa
pH稳定性**	2~11

*检测条件： 层析柱16mm×300mm  *柱床高5cm,25℃, 流动相为0.1mol/LNaCl
**取决于配基
3． 包装
产品以聚胺酯瓶密封包装，外贴标签，注明“品名、体积、颗粒大小、保质期、批号、生产日期、生产单位及地址” 等内容。所选用的包装应有利于保证产品质量、方便运输和贮存。
4. 运输
运输中应避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。
5. 贮存
冷冻干燥的产品应密封贮存在8℃以下，通风、干燥、清洁的地方。
6.保质期：暂定18个月。
7.应用
溴化*活化琼脂糖微球是一种亲和层析中间体，可偶联其他配体，用于生物大分子的纯化分离。
下面简要介绍介质偶联配体的使用过程。具体实验条件取决于配基，应根据具体配基选择偶联、洗脱和再生条件。
7.1干粉的溶胀
称取一定量的溴化*活化琼脂糖微球冻干粉放置在1mmol/LHCl中悬浮溶胀（1g干粉约溶胀为3~4ml凝胶），放置大约30分钟后抽滤，用约15倍胶体积的1mmol/L HCl溶液冲洗干净，用偶联缓冲液洗涤，抽干。
7.2  配体的偶联
     一般配体偶联的过程如下：
（1）将所需要偶联的配基溶解到含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/LNaCO₃ （PH8.3）缓冲溶液中，加入溶胀的溴化*活化高流速琼脂糖微球。
（2）在室温中搅拌反应2~4小时或者在4℃下过夜反应。
   （3）反应完全后，用5倍反应体积的偶联缓冲液洗涤掉其中多余的配体，10倍体积的水洗。
   （4）将反应完洗涤过的凝胶悬浮到水中，加入乙醇胺（1mol/L），在常温最少搅拌反应2小时，以消除残余活性基团。
   （5）用含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/L醋酸盐缓冲液（PH 4.0）和含有0.5mol/LNaCl的0.1mol/LTris-HCl缓冲液（PH 8）交替洗涤，至少重复以上循环洗涤3次。用10倍柱体积的PBS洗涤。
7.3 装柱
⑴让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
 ⑵根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉溶液，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。匀浆作脱气处理。
⑶将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
⑷  用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
⑸打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
7.4平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。平衡缓冲液一般是根据需要纯化的蛋白来决定用哪种缓冲液。
7.5上样
⑴样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。
⑵一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
⑶介质对样品组分吸附的程度取决于介质配基的亲和作用、样品的亲和性质、流动相的组成和温度。
(4)再用缓冲液平衡到流出液电导和pH不变。
7.6洗脱
洗脱液也要根据需要纯化的蛋白决定。
7.7再生
   对于使用之后的凝胶，以2~3倍柱体积的0.1mol/L Tris·HCl+0.5mol/L NaCl（PH=8.5）和0.1mol/LNaAc+0.5mol/L NaCl（PH=4.5）依次反复冲洗3~4次，进行再生。
7.6 在位清洗
一般清洗用再生处理就可以达到目的。对于难除去的杂质，可用在位清洗处理。
在位清洗可以用非离子表面活性剂加在pH8.5缓冲溶液清洗。
也可以用20~70%乙醇清洗，再用水清洗。
清洗完毕后，用至少5倍缓冲液平衡柱子。
7.7注意
在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。