AccuPower® CycleScript RT预混合物系列(dT20, dN12 & dN6)适用于循环反转录（CRT,专利技术），为即用型反转录试剂盒，包含热稳定的CycleScript反转录酶，dNTPs,反应缓冲液，dT20或随机引物，CRT及反转录反应稳定剂，产品在-20℃可稳定保存三年。 该产品适于恒温反转录，也适于通过类似PCR的2步或3步温度改变进行循环反转录(CRT)。 恒温反转录与循环反转录操作步骤如下： 1.恒温反转录 第一步: RNA变性(65℃, 10 min) 第二步: cDNA合成(37-55℃, 15-60 min) 2. 循环反转录 第一步: 引物退火(15-40℃, 30 sec) 第二步: cDNA合成(42-48℃, 4 min) 第三步(可选) : RNA模板二级结构解链及cDNA合成(50-55℃, 30 sec) Bioneer创新的CRT技术打破了传统的42℃恒温反转录的限制，通过诱导引物在相对较低的温度(15-40℃)均匀退火和RNA模板二级结构在相对较高温度（50-55℃)的解链，使得cDNA合成效率更高。 AccuPower® CycleScript RT预混合物为冻干粉，单管中包含反转录酶，引物，及其它常规cDNA合成的组分。简单地加入模板RNA和水后可进行循环反转录（CRT，专利技术），采用该方法可得到比传统反转录反应更好的结果。 特点及优势 ●使用方便:冻干的反转录预混合物包含CycleScript反转录酶, dNTPs, 缓冲液, dT20或随机引物及稳定剂。 ●灵活的温度条件:介于37-55℃之间宽范围的工作温度，采用新型循环反转录（专利技术）。 ●高性能:10分钟内即可从高拷贝基因合成足够量的cDNA。 ●无核酸酶:无RNase, DNase及蛋白酶。 ●热稳定性:由于含有稳定剂反转录温度可高至55℃，在-20℃能够稳定保存三年。 特点 预混合物组分 应用 •从RNA合成cDNA第一链 •DNA测序 •RNA测序 •随机引物反应 •文库构建 •探针标记 •RT-PCR •通过引物延伸分析进行mRNA 5’末端绘图 反应条件 反应条件和温度