淋巴细胞包含T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞( CD3-CD19+)、NK细胞( CD3-CD16+CD56+), 其中T淋巴细胞是淋巴细胞的主要组成部分。
T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞,“thymus dependent lymphocyte”简称T细胞
CD3+淋巴细胞指的是全T淋巴细胞,包含CD3+CD4+ 细胞(辅助/诱导T淋巴细胞)、CD3+CD8+细胞(抑制/细胞毒T淋巴细胞)。CD4+CD45RA+/CD4+CD45RA+62L+ (CD4+T细胞纯真亚群)和CD4+CD45RA-/CD4+CD45RO+(记忆亚群)、CD28+(功能亚群)、CD38+、HLA-DR+( 激活亚群)、CD95+(凋亡亚群)等。
最基础的通过流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+和CD8+含量。
实验步骤:
1.取100μL全血加入30μL肝素钠溶液处理成抗凝血;
2.取抗凝血100ul加入FITC anti-mouse CD3 Antibody(2μL)、APC anti-mouse CD4 Antibody(1μL)、PerCP/Cyanine5.5 anti-mouse CD8b.2 Antibody(1μL);
3.避光孵育30min;
4.加入红细胞裂解液2mL,轻轻吹打混匀,室温避光反应10min,以1500rpm离心5min, 弃上清;
5.加2mL PBS混匀后,1500rpm离心5min,弃上清;
6.细胞沉淀加入500ul PBS重悬后上流式仪检测。
结果展示:
临床意义:
1. CD3下降常见于以下几种情况:
①恶性肿瘤;
②自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等;
③先天性免疫缺陷病,如艾滋病;
④接受化疗、放疗或者使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂。
2. CD3上升则常见于重症肌无力、慢性活动性肝炎等。
3. CD4淋巴细胞减少常见于恶性肿瘤、艾滋病、遗传性免疫缺陷病、 应用免疫抑制剂的患者。
4. CD8淋巴细胞增多常见于自身免疫病,如慢性活动性肝炎、SLE、肿瘤及病毒感染等。
5. CD4/CD8的比值做为免疫调节的一项指标,正常值约1.4~2.0,在细胞免疫功能紊乱的情况下CD4/CD8比值会出现升高或降低。CD4/CD8<1.4常见于以下几种情况:
①免疫缺陷病,如艾滋病CD4/CD8比值常小于0.5 ;
②恶性肿瘤;
③再生障碍性贫血,如某些白血病;
④某些病毒感染,如急性巨细胞病毒感染;
⑤其它的像传染性单核细胞增多症、SLE肾病、骨髓移植恢复期等。
CD4 / CD8 > 2.0常见于自身免疫性疾病,如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、1型糖尿病等。另外器官移植的排斥反应也可用CD4/CD8的比值来监测,若移植后若发生排异反应,CD4/CD8的比值较移植前会明显增加。
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