DNA CpG甲基化检测—HRM法-分子生物学服务 -技术服务-生物在线
北京康为世纪生物科技有限公司
DNA CpG甲基化检测—HRM法

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产品名称: DNA CpG甲基化检测—HRM法

英文名称: DNA CpG甲基化检测—HRM法

产品编号: CWS026

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  DNA甲基化是一种表观遗传修饰,它是由DNA甲基转移酶(DNA methyl-transferase, Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体,将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶(mC)的一种反应,在真核生物DNA中,5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位点,它在基因组中呈不均匀分布,存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域,在哺乳动物中mC约占C总量的27%。一般说来,DNA的甲基化会抑制基因的表达。DNA的甲基化对维持染色体的结构、X染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起重要的作用。
  HRM法原理:用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶则不变。在非CpG岛位置设计一对针对经亚硫酸氢钠处理后DNA 链的引物,这对引物中间包含有意义的甲基化CpG岛,一旦这些CpG岛发生甲基化,胞嘧啶(C)不发生变化,而未甲基化的胞嘧啶(C)转变成胸腺嘧啶(T),样品中的 GC 含量发生了变化,最终被转化成了熔解曲线 Tm 值之间的差异

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CWS026

Real-Time PCR

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5-6周

 

服务内容
  1. 基因组DNABisulfite转化。
  2. HRM(High Resolution Melting)法(Real-Time PCR)

样品要求
  ·若提供基因组DNA,需≥2ug
  ·若提供的材料为新鲜组织、血液、细胞等生物材料,请提供足够提取2ug以上基因DNA的材料量。
  ·基于所选择的DNA甲基化检测方法,请提供相应的引物或引物序列。


终产品
  ·Bisulfite处理的基因组DNA
  ·实验报告(包括扩增曲线、HRM曲线)。

服务说明
  ·在基于Bisulfite 转化的DNA甲基化检测的方法中,引物是决定实验成败的关键因素,且视期望检测的目的基因片段的不同,适宜引物的存在与否有较大的不确定性,请尽量采用其可行性经过验证的引物,如因引物等非本公司原因导致某实验步骤失败,使服务提前终止,已启动的实验项目正常收费。若需DNA甲基化检测用引物设计服务,价格另议。