石蜡包埋
产品名称: 石蜡包埋
英文名称: Paraffin Embedding
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产品价格: 20
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制作石蜡切片,切片前须将石蜡渗透组织包埋于石蜡中,而水与石蜡又是不相混合的,所以在浸蜡,包埋前必须将组织内所含的水分脱去。而大多数的组织固定剂是水溶液,随后的水冲洗也使其含有大量水分,因此必须先行脱水,一般是浸入逐级增加浓度的酒精来完成。由于酒精和石蜡不能混合,须再用一种石蜡的溶剂来置换酒精,因大多数石蜡溶剂有使组织的折光率增高并表现为透明或半透明状,所以此步骤又称透明。最后用石蜡浸渍组织并铸制成坚实的蜡块。常规的石蜡包埋过程包括五个基本步骤,即固定,脱水,透明,浸蜡和包埋。
材料的好坏直接影响到切片的质量,无论取哪一种动植物材料,必须注意植物材料选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分;动物材料取用时将动物杀死后迅速取出所需要的组织。
1. 固定 :
组织和细胞离开机体后,在一定时间内仍然延续着生命活动,会引起病理变化直至归于死亡。为了使标本能反映它生前的正常状态,必须尽早地用某些化学 药品迅速地杀死组织和细胞,阻抑上述变化,并将结构成分转化为不溶性物质,防止某些结构的溶化和消失。这种处理就是固定。除了上述作用外,固定剂会使组织适当硬化以便于随后的处理,还会改变细胞内部的折射系数并使某些部分易于染色。 固定剂的作用对象主要是蛋白质,至于其他成分如脂肪和糖,在一般制作时不加考虑,如要观察这些物质,可用特殊的方法将其固定下来。
2. 脱水 ;
生物组织中含有大量的水分,它和石蜡是不能相溶的,致使在包埋时石蜡无法渗入组织内部,因此须使用脱水剂将水分除尽,这就是脱水的作用。 脱水剂必须能与水以任何比例相混合。脱水剂有两类:一类是非石蜡溶剂,如乙醇、 等,脱水后必须再经过透明,才能透蜡包埋;另一类是兼石蜡溶剂,如正丁醇,脱水后即可直接透蜡。
3. 透明:
在二甲苯的时间不宜过短或过长。时间过短引起透明不充分,影响后面渗透包埋;时间过长则引起组织变脆
4. 浸蜡:
若出现从脱水到渗透时间太长,可在1/2二甲苯+1/2石蜡或石蜡I的步骤停下,即将进入1/2二甲苯+1/2石或石蜡I后,立即冷却,将组织封进里面,到第二天复融;第二天融解时温度不能超过65℃,并且需到完全溶解时开始进入步骤算时间。
5. 包埋: