Realtime PCR技术服务
产品名称: Realtime PCR技术服务
英文名称: realtime pcr technical services
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上海辉澳生物医药科技有限公司
- 联系人 :
- 地址 : 徐汇区肇嘉浜路608号1006室
- 邮编 : 200032
- 所在区域 : 上海
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- 邮箱 : 870319zyq@163.com
◇服务内容:
1、目的基因表达的定性和定量分析(相对定量和绝对定量);
2、基因芯片的结果验证;
◇质量保证:
我公司多年专业Realtime PCR技术服务,我们保证对所售任何产品一概负责到底,每一份实验结果都真实可靠!
我公司多年专业Realtime PCR技术服务,我们保证对所售任何产品一概负责到底,每一份实验结果都真实可靠!
◇具体操作:
一、定性分析:
1、将得到的样品(组织或细胞)进行RNA提取,并反转录cDNA(必须设立阴性对照和阳性对照,操作同样品);
2、进行Real-time检测(操作同下);
二、定量分析:
(一)相对定量
1、将得到的样品(组织或细胞)进行RNA提取,并反转录cDNA(必须设立阴性对照和阳性对照,操作同样品);
2、分别选取阴性对照、阳性对照及部分样品为模板,采用内参和目的基因的引物(一般为b-actin和GAPDH)进行普通PCR,琼脂糖凝胶电泳观察结果,明确扩增产物的特异性;
3、Real-time检测:
(1)如采用SYBR荧光染料,为每一样品分别设立内参组和目的基因组,各为三复孔;如采用荧光探针,可在同一孔内进行内参和目的基因的表达,设立三复孔;
(2)加样后上机检测,并完成融解曲线的检测;
(3)分析结果:溶解曲线分析引物特异性;
根据ct值计算相对定量值;
(二)绝对定量
1、将得到的样品(组织或细胞)进行RNA提取,并反转录成cDNA(必须设立阴性对照和阳性对照,操作同样品);
2、分别选取阴性对照、阳性对照及部分样品为模板,采用内参和目的基因的引物(一般为b-actin和GAPDH)进行普通PCR,琼脂糖凝胶电泳观察结果,明确扩增产物的特异性;
3、Real-time检测:
(1)检测各样品的内参,以调整各样本DNA总量达到一致;或通过紫外分光光度法测定DNA的含量,调整DNA总量达到一致;
(2)将标准品按梯度稀释后,进行目的基因的检测,制备ct值和目的基因拷贝数相互关系的标准曲线;
(3)将样品进行目的基因的检测后,根据标准曲线计算目的基因的含量;
(4)分析结果:溶解曲线分析引物特异性;
根据ct值计算目的基因的定量值;
◇郑重声明:
请客户在取材前尽量先与我公司销售技术人员沟通,前期的取材直接影响到您的实验结果。我们有成套的售前售后服务,凡不是在我公司购买的ELISA产品,恕我公司概不负责售后服务。
◇服务价格:请询价。