产品内容：
试剂一：液体60mL×1瓶，-20℃保存；
试剂二：液体0.6mL×1瓶，-20℃保存；
试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入到试剂三中溶解待用；
试剂五：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入4mL双蒸水，用不完的试剂仍4℃保存；
试剂六：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入3.333mL双蒸水，用不完的试剂4℃保存。
产品说明：
 SDH（EC 1.3.5.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶，位于线粒体内膜上的一种膜结合酶，是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外，为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸，脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸（PMS）传递还原2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），并且在600nm处具有特征吸收峰，通过600nm吸光度的变化，测定2．6-DPIP的还原速度，代表SDH酶活性。
 
试验所需自备仪器和样品：
 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
 
操作步骤：
一、SDH的提取
准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL 试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨，4 ℃ 11000 g离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤和加样表
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。
2、样本测定
试剂名称（μL）
测定管
空白管
试剂三
60
60
试剂五
60
60
蒸馏水
800
800
37℃(哺乳动物)或25℃（其它物种）保温10min左右
样本
30
 
蒸馏水
 
30
试剂六
30
30
依次加各试剂到1 mL比色皿中，在加入试剂六的同时开始计时；在600 nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1，比色后迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中，准确反应1分钟；迅速取出比色皿并擦干，600 nm下比色，记录1分20秒时的吸光度A2，计算ΔA=A1-A2，得到ΔA测定，ΔA空白。
三、SDH活性的计算
用1mL比色皿测定的计算公式如下
（1） 按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
SDH活性（U/mg prot）＝[（ΔA测定-ΔA空白）÷（ε×d）×V反总×109]÷(Cpr×V样) ÷T  
＝1555.556×（ΔA测定-ΔA空白）÷Cpr
（2） 按样本鲜重计算
单位的定义：每g