1、合成shRNA时请带荧光，若shRNA不带荧光、请使用荧光对照，方便查看转染效率

2、shRNA浓度：20uM/L

3、shRNA和转染试剂复合物制备：shRNA取8ul和转染试剂取8ul，吹打混匀室温静置15分钟，无需另外加入任何试剂稀释

4、细胞转染前状态：拍10和20倍镜细胞明场照片留存

5、贴壁细胞铺板：6孔板完全培养基2ml、培养基中不加双抗，细胞密度：60%左右

6、转染：将复合物加入后轻摇混匀、放入培养箱培养

7、换液：合计转染24小时后培养基换液

8、转染效率：总计转染48小时后拍荧光照片，查看转染效率

9、转染后细胞状态：拍10和20倍镜细胞明场照片留存

10、检测：转染48小时后提取RNA或蛋白检测

二、公司介绍

上海转染生物科技有限公司是服务于高校和科研院所生命科学基础研究、生物医药研发、细胞生物学产业化等相关领域的高科技生物技术企业。我们服务于生命科学研究、活体动物转染、大规模生物制品生产、基因和细胞治疗领域等客户。提供的第三代细胞内可代谢的ZetaLife AdvancedDNA\RNA转染试剂，解决了部分细胞转染效率低、脂质体转染毒性大、需要无血清环境的这些问题；提供的in vivo Advanced活体动物体内转染试剂可以通过静脉注射或体内局部组织注射的方式完成转染过程; 提供的inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清D 细胞培养规模生产支持；提供以植物生物为平台基因序列全部人源化、细胞培养可分解的3D基质胶产品；提供内毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品等。

美国Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂，此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。