新一代测序技术与传统测序技术的优缺点分析
产品名称: 新一代测序技术与传统测序技术的优缺点分析
英文名称: 新一代测序技术与传统测序技术的优缺点分析
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从费用角度、适用范围和限制性来说,传统测序仪和新一代测序仪抗原肽之间具有明显的差距。因此,对于每一个具体的项目来说,都需要仔细考虑,选择出最合适的测序仪。传统的Sanger测序法适用于对kb~mb长度的DNA片段进行的小规模的测序项目。Sanger测序法相比新一代测序法而言具有极大的“间隔尺寸(granularity)”,既能用于大型项目也能用于小型项目。虽然与传统测序仪相比,新一代测序仪在某些方面很明显地处于劣势,比如在测序长度和准确率方面,但即便如此,在处理大规模的测序项目时大家还是倾向于选择新一代测序仪抗原肽。
看看新一代测序仪对以往使用传统测序仪进行的生殖细胞突变和体细胞突变研究的帮助就可以认识到它们的作用有多么强大。在这项研究里,使用Sanger测序法除了试剂这一项费用之外,其它的费用也远远高过了使用其它新一代测序仪。这些其它费用包括在96孔板或384孔板中处理样品的费用、电泳费用、大量的生物信息学处理费用以及设备维护人工费用等。研究人员最近对100份样品中的100个基因使用传统测序方法究竟需要花费多少费用进行了一次非正式的调查,假设每个基因平均由10个外显子组成,结果发现整体费用在30万美元至100万美元不等,价格依据测序单位是非盈利的基因组测序中心还是商业化的测序服务机构而不同。很显然,这么高昂的费用对于任何一个实验室来说都是难以承受的。新一代测序仪除了能将测序费用降低好几个数量级之外,它们还具有所需仪器设备少的优点,不过新一代测序仪在后续数据处理方面会碰到问题。
各款新一代测序仪之间也有非常明显的差异(表10),它们都有各自“拿手”的绝活(表11)。有一些测序项目,比如重测序(resequencing)对于测序仪的测序长度要求就没有从头测序的要求高。对于需要依靠标签计数(tag counting)的测序项目,例如在定量分析蛋白质与DNA之间的相互作用时,我们就会更加需要能将待测片段分割成尽量多、尽量小片段的测序方法。测序的准确度和各自相对拿手的项目,比如是善于发现插入、缺失突变还是善于发现碱基替换突变也是需要着重考虑的问题。另外,在进行从头测序或发现结构性变异的研究时使用的配对测序法已经广泛应用于各种新一代测序仪当中。这时,这些配对的模板片段在芯片上的分布情况,比如相互之间的距离远近等就是需要重点考虑的问题了。
最后,需要考虑的当然是价格因素,各个新一代测序仪的费用都不相同,作为消费者,当然希望各个测序仪生产厂家之间的竞争更加激烈一点。http://www.ontoresinc.com/ 单纯比较每个碱基的测序费用是一个不错的选择方法,不过有时这也会误导我们,比如准确率更高的方法当然费用会高一些