细胞增殖与毒性检测(CCK-8、MTT)

CCK-8检测细胞增殖（活力）：CCK-8（cell-counting kit-8）检测试剂盒是应用WST-8取代MTT被还原，WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。且WST-8相较XTT和MTS化学性状更稳定， 因此实验结果相对更加稳定。此外，WST-8相较MTT、XTT，线性范围相对宽，灵敏度更高。

当细胞增殖得越多越快，则formazan产生量越多，颜色越深；反之，当内外因造成的细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。应用酶标仪测定吸光值并进行统计学计算便可以获得细胞增殖（活性）相关数据。

应用：
肿瘤细胞增殖活性的检测
目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性研究
小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究
中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究
目的基因过表达的基因功能研究
目的基因RNAi干扰的基因功能研究
microRNA过表达/干扰的调控机制研究

实验原理

    CCK-8（Cell Counting kit-8）试剂中含有WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐]，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物（Formazan），生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比，可采用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，间接反映活细胞数量。

 实验流程

锐赛贴士：MTT法虽然经典，但因步骤相对较多，耗时较长，相对很多新技术其优势已无力维持，目前正逐渐淡出我们的市场服务范围；相对MTT耗时和相对多步骤，MTS与CCK-8的方法因减少了时耗和人耗，因此成本已经得到最大程度的降低，MTS法成本最低，而CCK-8法的稳定性和准确性可以为客户带来最优化的实验结果。 

锐赛优势：锐赛多年来致力于为客户打造最优化的实验方案和最可靠的实验方法，经过多年的实验实践积累，本着对客户负责的原则，我们总是在可靠的实验基础上为客户选择最优化的实验方法，使成本更低，并还利于客户的同时，方法的准确度和可靠性都更值得信赖。 

锐赛采用自主研发的CCK-8试剂盒，经过一系列对比试验，稳定性都优于市场上的同类品牌产品，且性价比极高。

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