细胞膜定位EGFP稳定细胞系（293）

货号：CY011

MEM-EGFP稳定表达293细胞株表达人GAP43基因（GeneID：2596）N端20 AA信号肽和EGFP的融合蛋白，定位于细胞膜。该细胞株的细胞膜发出绿色荧光，可用于细胞膜定位相关实验或者细胞膜定位基因的研究。

细胞特性：

细胞来源：HEK293V细胞（人胚肾细胞）

表达蛋白：细胞膜定位EGFP蛋白

构建载体：pLV-MEM-EGFP（货号VL3501）

筛选抗生素：嘌呤霉素

培养基：DMEM高糖培养基+10%FBS

细胞培养方法：

为保持细胞良好的状态，HEK293V细胞密度达50%时就需要传代。由于细胞生长迅速，一般2-3天需传代一次。 
注意：及时传代对保持细胞状态极为重要。 
以25cm培养瓶传代为例。

1、传代前将细胞培养液、PBS和胰蛋白酶温浴到37℃。

2、吸去细胞培养液。

3、用PBS漂洗1到2次。

4、加入3ml胰蛋白酶，轻轻晃动细胞瓶，使胰蛋白酶均匀覆盖细胞。吸去胰蛋白酶，将培养瓶放置在细胞培养箱中，37摄氏度消化。由于配制的胰蛋白酶活力有差别，消化时间可用30秒到1分钟。应在倒置显微镜下观察，看到细胞分开及稍微变圆即可。

5、加入5ml 细胞培养基，用吸管轻柔吹打分散细胞。

6、按1:4到1:5接种细胞。