北京华夏远洋科技有限公司
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原核表达服务
有各种特性的质粒(包括pET系列、pGEX系列、pMAL系列)及与之匹配的大肠杆菌菌株可供选择,根据特定系统和用途决
定相应的实验方案
可以融合GST、Maltose等标签,提高外源蛋白的可溶性
原理
将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。原核蛋白表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统,能快速表达纯化各种不同来源蛋白。所制备的重组蛋白可用于药物筛选、结构生物学研究、细胞生物学研究、蛋白质组学研究等的一系列生物医学领域的研究。
原核表达一般用于表达几乎所有无特殊修饰的蛋白质,可在不同的菌株中表达,同时尝试不同的诱导条件,包括:诱导时OD值、诱导温度、IPTG浓度、诱导时间。
服务流程
1) 客户提供:提供已克隆在原核表达载体/克隆载体上的质粒或菌株;提供相关资料及核酸/蛋白序列,由我们利用生物信息学的方法进行分析处理后提出具体可行的实验方案
2) 表达质粒的构建
3) 质粒转化及高表达菌株筛选
4) 转化菌摇瓶培养,诱导表达
5) 目标蛋白纯化
6) SDS-PAGE 检测表达及纯化情况
7) 我们提供:初步的培养条件和合理的纯化工艺;纯化后的蛋白;SDS-PAGE蛋白电泳结果和详细的实验记录;产品报告(含相关数据、SDS-PAGE及质粒测序结果等)