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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
Hieff Smearase酶切试剂

Hieff Smearase酶切试剂

商家询价

产品名称: Hieff Smearase酶切试剂

英文名称: Hieff Smearase

产品编号: 12907ES08

产品价格: 563.00

产品产地: 翌圣生物

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2024-07-19T11:35:03

使用范围: null

规格 价格
8T 563.0
24 T 1263.0
96 T 4663.0
5000 T 89965.0
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
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Hieff ® Smearase 是针对高通量测序平台设计的新一代酶切试剂。本品采用高质量的片段化酶,酶切效果稳定,偏好性 低,可有效降低片段化的时间和成本,摆脱了繁琐的超声步骤,让片段化过程变得更加简单高效。

 

产品信息

货号

12907ES08 / 12907ES24 /12907ES96/12907ES98

规格

8 T /24 T /96 T/5000 T

 

组分信息

组分编号

组分名称

12907ES08

12907ES24

12907ES96

12907ES98

12907

Hieff ® Smearase

80 μL

240 μL

960 μL

50 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期18个月。

 

注意事项

1.  本试剂盒兼容范围为 1 ng – 1 μg Input DNA。应尽可能使用 A260/A280 = 1.8-2.0 的高质量 Input DNA。

2.  若 Input DNA 中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐,可能会影响后续实验,建议将 DNA 稀释在 ddH2O 或不含 EDTA的 10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化,EDTA 耐受范围为 0-2 mM。

3. 对于常规的高质量基因组 DNA,酶切时间参考表 1。本试剂盒片段化偏好低,耐受各种 GC 含量的模板。

                                            表 1 常规基因组 DNA片段化时间推荐表

插入片段主峰大小

片段化时间

优化范围

600 bp

5 min

3-10 min

400 bp

10 min

8-15 min

250 bp

15 min

10-20 min

200 bp

20 min

12-25 min

150 bp

25 min

20-30 min

【注】:以上为推荐时间,需客户在自己的实验体系中进行微调,以达到最佳效果。

4. 参考表 1 片段化时间可将 DNA 酶切为所需大小,为保证优质稳定的片段化效果,片段化过程请于冰上操作。

5. 该酶在高温条件下即可失活。

6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7. 本产品仅用作科研用途!

 

使用方法

DNA 片段化(DNA Fragment) 

该步骤将基因组 DNA 片段化。

1. 将表 2 中试剂解冻后,颠倒混匀,置于冰上备用。

2. 于冰上配制表 2 反应体系。

                                               表 2   DNA 片段化PCR反应体系

名称

体积(μL)

Input DNA

x

Hieff ® Smearase

10

ddH2O

Up to 60

3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀,并短暂离心将反应液离心至管底。

4. 将上述 PCR 管置于 PCR 仪,设置表 3 所示反应程序,进行 DNA 片段化反应。

                                               表 3   DNA 片段化PCR反应程序

温度

时间

热盖 105°C

On

4 °C

1 min*

30 °C

3-30 min**

72 °C

10 min

4 °C

Hold

【注】:*DNA 片段化过程为有效控制片段化效果,避免过度酶切,反应程序可预先设置 4℃,待模块温度降至 4℃时,将 PCR 管放入 PCR 仪即可。

**对于完整的基因组 DNA,酶切时间参考表 1。

5. 产物如需纯化,可使用 Hieff NGS® DNA Selection Beads(Cat#12601)或 AMPure XP Beads(Cat#A63880)或其他等效产品。

参考实例

使用 Hieff ® Smearase 对 Human gDNA 样本进行酶切,片段化结果见图 1。

图 1   Hieff ® Smearase 酶切 200 ng Human gDNA 样本(不同酶切时间片段化效果检测)

 

 

Ver.CN20240617