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武汉云克隆诊断试剂研究所
缺氧缺血性脑损伤(HIE)小鼠模型

缺氧缺血性脑损伤(HIE)小鼠模型

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产品名称: 缺氧缺血性脑损伤(HIE)小鼠模型

英文名称: Mouse Model for Hypoxic Ischemic Encephalopathy (HIE)

产品编号: DSI685Mu01

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来源
间歇性缺氧(CIH)导致的脑损伤
模式动物品系
SPF级C57BL/6 小鼠,雄性,6~8周
实验分组
随机分组:对照组,模型组,阳性药物组和药物组,每组15只
实验周期
4~6w
建模方法
CIH动物造模:
小鼠暴露于慢性间歇性低氧(CIH)或空气(IA)中,被喂以高脂肪,高胆固醇饮食。CIH处理为FIO2 cycling from 21 to 6.5%, 60 times/h, 9:00 A.M. to 9:00 P.M.。 供应饲料量采用限制饲喂,第1 周内每只鼠13 g,以后每周增加2 g,至第4周为止;每日饲养分2 次供给,吃完后不再添加。间歇低氧过程中动物不进饮食,其余时间置小鼠饲养笼。非CIH组每日相同时间置入相同规格的动物舱内,不提供间歇低氧,给予空气脉冲供气。
取材组织标本:动物处死留取附睾脂肪垫,心脏组织标本;血管标本:动物处死后从左心室缓慢灌流PBS,分离主动脉弓。
应用
疾病模型
组织病理学
动脉斑块形态性质观察
1. HE染色
血管标本用4%多聚甲醛固定,石蜡包埋切片,用HE染色,观察主动脉弓动脉粥样硬化斑块情况。分析总斑块横断面面积和斑块坏死区。
2. 免疫组化
免疫组化检测小鼠主动脉斑块CD68表达(巨噬细胞表达)。
3. 扫描电镜观察动脉斑块
放血处死动物,解剖出腹主动脉,快速提取小鼠的腹主动脉样本,切成长度约0.5-1.0cm
的血管段,用角膜剪纵向剖开血管腔,浸泡于PBS缓冲液中清洗3次,再将其固定在滤纸上,充分暴露血管内腔表面,迅速畳于预冷的2.5%戊二醛溶液,与冰箱4℃固定3-4h后,再经过梯度酒精和丙酮脱水等标准流程处理后,将标本内皮朝上,平铺于扫描电镜的载物台上,置于扫描电镜下,调至仪器工作电压至20千伏,观察观察扫描电镜下不同不同动物组的动脉斑块,有无斑块破裂、血栓形成等现象。

标志因子水平
组织检测
1 RT-PCR
检测附睾脂肪垫,心脏组织FIH-1、HIF-1的mRNA水平。
2 Western blot检测
检测附睾脂肪垫,心脏组织FIH-1、HIF-1的蛋白水平。

统计学分析
应用SPSS软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x ±s)表示,采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示有显