腺病毒RNAi干扰服务-分子生物学服务 -技术服务-生物在线

产品名称：腺病毒RNAi干扰服务

英文名称：腺病毒RNAi干扰服务

产品编号：

产品价格： 0

产品产地： null

品牌商标： null

更新时间： null

使用范围： null

北京华夏远洋科技有限公司

进入展台

腺病毒RNAi干扰服务

可获得复制缺陷型（E1和E3缺失，为第二代病毒）的腺病毒，生物安全性更高；获得的重组病毒在培养基中非常稳定，甚至

反复冻融也不会丧失活力

感染几乎所有的细胞类型，不整合到染色体中，无插入致突变性

能有效进行增殖，滴度高：病毒原液滴度在1E8 - 1E9 pfu/ml，浓缩后可达1E10 - 1E11 pfu/ml，这一特点使它非常适用于基因治疗

原理

腺病毒（adenovirus，AV）是一种没有包膜的线状双链DNA，它能感染分裂细胞和非分裂细胞，在核内以神经元细胞的形式复制，

存在多种AV血清型。到目前为止，构建的绝大多数载体都是基于血清型2和5，通过转基因的方法取代E1或E3基因，降低病毒的复

制能力。这些重组病毒仅在表达高水平E1和E3基因的细胞中复制，因此适合应用于治疗的高效控制系统。腺病毒载体能够高效传递

和表达基因的能力（尤其是在体外），由于具有宿主范围广，对人致病性低；在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因；能有效进行

增殖，滴度高；与人类基因同源；不整合到染色体中，无插入致突变性。对于难转染的细胞，如原代或非分裂细胞，采用病毒递送

miRNA/shRNA的方式是非常有效的选择。

服务流程

1) 客户提供：表达miRNA/shRNA的质粒（提供测序图谱）或所要Knockdown的靶基因的名称、序列；所需要的病毒滴度

及总量，病毒是否需要纯化；若需要检测靶基因的表达变化，如需要请提供相应的抗体

2) 构建表达miRNA/shRNA的腺病毒载体，采用PacI消化纯化质粒使ITRs裸露出来

3) 将腺病毒表达克隆转染293A细胞。收获细胞以制备病毒粗提液

4) 将病毒粗提液感染293A细胞以扩增病毒。确定病毒滴度

5) 将病毒上清加入靶细胞中

6) 分析miRNA/shRNA的表达和相应的Knockdonw结果

7) 我们提供：提供重组后的腺病毒载体质粒，并附上PCR鉴定结果；提供已测定好滴度、可以直接进行后续分析的腺病毒储存液