MycAway™ -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus 一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版)
产品名称: MycAway™ -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus 一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版)
英文名称: MycAway™ -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus 一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版)
产品编号: 40612ES25
产品价格: 0
产品产地: Yeasen
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2023-08-17T13:40:59
使用范围: null
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MycAway™ -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus
一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版)
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
储存 |
价格(元) |
促销价 |
MycAwayTM-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus 一步法快速支原体检测试剂盒(防污染版) |
40612ES25 |
25 T |
-20 °C |
1653.00 |
952.00 |
40612ES60 |
100 T |
-20 °C |
6283.00 |
3352.00 |
产品描述
MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus(防污染版)是利用Yeasen独特的等温扩增技术,专门针对细胞培养液中支原体污染的快速检测产品。较以往支原体检测产品(货号:40611),本试剂盒中加入了UDG酶,以便去除含dU的PCR产物气溶胶污染,在极大程度上抑制假阳性反应,提高检测的准确度。而且加入的UDG酶在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活,不影响实验结果。
主要原理是若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增,使反应液由蓝紫色变成天蓝色,结果肉眼可辨,无需电泳。
翌圣MycAwayTM -Color One-Step Mycoplasma Detection Kit UNG Plus(防污染版)可以检测多种支原体,包括细胞培养过程中常见的8种支原体。传统巢式PCR支原体法检测法易受细胞培养上清中抑制物的影响,产生假阴性结果;反应后需开盖电泳检测,增加污染导致的假阳性风险。一步法支原体检测试剂盒完全没有上述缺点,且其检测灵敏度、准确性远远高于PCR法。
产品组分
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
40612ES25/25T |
40612ES60/100T |
||
40612-A |
MycAwayTM -Color A |
600 μL |
600 μL×4 |
40612-B |
MycAwayTM -Color B |
25 μL |
25 μL×4 |
40612-C |
Positive Control |
10 μL |
10 μL×4 |
40612-D |
矿物油 |
500 μL |
500 μL×4 |
运输与保存方法
冰袋运输。
-20 °C避光保存,保质期18个月。若较长时间不用,请注意避光保存。
注意事项
1)使用本试剂前请仔细阅读说明书。
2)整个实验,应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 支原体待检样本准备
贴壁细胞:直接吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上,且汇合度达到90%左右时取样,此时上清中支原体含量较高,便于检出。
悬浮细胞:500 g离心5 min后,吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上时取样,此时支原体含量较高,便于检出。
2. 反应体系
将MycAwayTM -Color从-20 °C取出,溶解后颠倒混匀,瞬时离心确保所有液体落到管底。根据待检测样品量,配制如下体系(通常实验需要设置阴性对照和阳性对照):
|
单次反应体积 (μL) |
|
总体积 (μL) |
MycAwayTM -Color A |
24 |
× 样品数 × 1.1* |
_____ |
MycAwayTM -Color B |
1 |
_____ |
【*】:移液器存在误差,配制时请多出10%为保证分装后每管的量。
3. 加样
待测样品:向其余反应管中加入1 μL待测培养上清;
阴性对照:第一支反应管中不加入任何样品,作为阴性对照;
阳性对照:向最后一个反应管中加入1 μL Positive Control,作为阳性对照。
【注】:1) 如果反应是在水浴锅中进行,则每管加入20 μL矿物油,以防止液体蒸发导致结果的误差。如果反应是在PCR仪中进行,不需要加矿物油。
2)实验室中支原体污染十分常见,鉴于本试剂盒反应灵敏,建议用户在超净台中配制组分,以免出现假阳性结果。
4. 反应条件
加完样后,先将样品在30 ℃放置5 min,再在水浴锅或PCR仪中,恒温63 °C孵育60 min。
【注】:本试剂盒所用酶对温度非常敏感,强烈建议使用PCR仪操作;如用水浴锅,应先加热使其达到规定温度后再反应。温差超过2 °C,将导致扩增效率降低,使阳性反应无法在说明书规定的时间内达到典型的天蓝色。
5. 结果判断
63 °C反应60 min后,立刻取出反应管,放于室温。在光线良好的环境中观察反应结果(建议以白纸为背景)。如果反应液仍为蓝紫色,则判定为阴性;若反应液为天蓝色,则判定为阳性。
【注】:在63 °C反应的时间必须准确计时,超过说明书规定的反应时间可能会出现假阳性。反应管不可开盖,否则会出现气空气中支原体污染反应,出现假阳性的现象。
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