selleck产品在文献中的引用:

      
    

        

            
J Invest Dermatol,   2011, 131(9):1886-95
        
        

            
Biochem Pharmacol, 2012, 83(12):1674-81
        
        

            
Int J Parasitol, 2010, 40(5):555-67
        
        

            
PLoS One, 2013, 8(1):e54595
        
        

            
Br J Haematol, 2012, 157(4):510-4
        
    

客户使用selleck产品的实验数据:

   更多详情请访问中国唯一官方网站www.selleck.cn/products/Sorafenib-Tosylate.html  
生物活性
     
         
             
产品描述
             
Sorafenib Tosylate是酪氨酸激酶(VEGFR和PDGFR)和RAF/MEK/ERK级联抑制剂，同时作用于Raf-1，wtBRAF和V599EBRAF，IC50分别为6 nM， 22 nM和38 nM。Phase 4
         
         
             
靶点
             
Raf-1
             
wtBRAF
             
V599EBRAF
             
 
             
 
             
 
         
         
             
IC50
             
6 nM [1]
             
22 nM
             
38 nM
             
 
             
 
             
 
         
         
             
体外研究
             
Sorafenib作用于这些细胞系(如 Mia PaCa 2, HCT 116, A549,和NCI-H460)，抑制ERK磷酸化,引起RAS/RAF通路的异常激活。Sorafenib作用于MDA-MB-231乳腺癌细胞系，完全抑制 MAPK 通路的激活。 Sorafenib 抑制 MEK 1/2 和ERK 1/2 磷酸化，这种作用存在剂量依赖性，IC50分别为40 nM和 100 nM。Sorafenib 作用于MDA-MB-231细胞，对 PKB通路没有效果，说明Sorafenib 选择性抑制MAPK, 而不抑制PKB通路。Sorafenib 作用于人胰脏(Mia PaCa 2)和结肠 (HCT 116和 HT-29)肿瘤细胞系，抑制pERK。Sorafenib 抑制EGFR,IGFR-1,c-met,和 HER-2 RTKs ，IC50>10,000 nM。此外, Sorafenibis 有效抑制细胞中VEGFR-2信号。Sorafenib 抑制mVEGFR-2 (flk-1), mVEGFR-3, 和mPDGFR-β，IC50 分别为15 nM, 20 nM,和 57 nM。[1]
         
         
             
体内研究
             
Sorafenib 按30 mg/kg或60 mg/kg 剂量每天口服处理HT-29肿瘤，与对照组相比，实验组50到80% MVA和 MVD受抑制。Sorafenib作用于Colo-205肿瘤, 可观察到MVA 和MVD明显受抑制，而不抑制MAPK。[1]
         
         
             
特征
             
 
         
     
 
推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)
激酶实验: [1]
     
         
             
生化实验
             
测定抑制多种RAF激酶亚型的效果, Sorafenib加到反应buffer[20 mM Tris (pH 8.2), 100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 和0.15% β-巯基乙醇] 中Raf-1(80 ng), wtBRAF, 或V599EBRAF (80 ng) 及MEK-1 (1 μg)的混合物中，DMSO终浓度为1%。加入25 μL 10 μM γ-[33P]ATP(400 Ci/mol)，开始 RAF 激酶实验(终体积为 50 μL)，在32oC下温育25分钟。过滤到磷酸纤维素垫上收集磷酸化的MEK-1，使用 1% 磷酸冲洗未结合的放射性。微波加热烘干, 使用β-计数板测定过滤结合的放射性。
         
     
 
细胞试验: [1]
     
         
             
细胞系
             
Colo-205, HT-29, 和DLD-1人结肠癌细胞
         
         
             
浓度
             
0 μM -10 μM
         
         
             
处理时间
             
2 小时
         
         
             
方法
             
Colo-205, HT-29, 和 DLD-1人结肠癌细胞系按每孔 2 × 105个细胞接种在12孔组织培养板上，过夜，孔中含DMEM 生长培养基(10% 热灭活FCS)。使用无血清培养基冲洗细胞一次，然后在含0.1% 无脂肪酸BSA的DMEM培养基中 与溶于 0.1% DMSO的不同浓度Sorafenib温育120分钟，测定pMEK 1/2, pERK 1/2,或pPKB的改变量。使用冰冻 PBS (含0.1 mM钒酸盐的PBS ) 冲洗细胞，然后溶于含蛋白酶抑制剂的1% (v/v) Triton X-100溶液中。离心净化裂解物，然后进行SDS-PAGE,再转移到硝化棉膜上, 然后在 TBS-BSA中阻断,再使用anti-pMEK 1/2 (Ser217/Ser221; 1:1000), anti-MEK 1/2, anti-pERK 1/2 (Thr202/Tyr204; 1:1000), anti-ERK 1/2, anti-pPKB (Ser473; 1:1000), 或anti-PKB一抗做探针。使用辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗进行印迹，然后使用Amersham ECL试剂在Amersham Hyperfilm上进行显影。
         
     
 
动物实验: [1]
     
         
             
动物模型
             
携带HT-29和Colo-205细胞的雌性NCr-nu/nu小鼠
         
         
             
配制
             
Cremophor EL/乙醇(50:50; 95%乙醇)
         
         
             
剂量
             
30 mg/kg或60 mg/kg
         
         
             
给药处理
             
口服处理
         
         
             
溶解度
             
2% Cremophor EL, 2% N,N-dimethylacetamide, 30 mg/mL