单B细胞抗体制备-抗体制备-抗体-生物在线
上海美迪西生物医药股份有限公司
单B细胞抗体制备

单B细胞抗体制备

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产品名称: 单B细胞抗体制备

英文名称: Single B Cell antibody discovery technology

产品编号: 05

产品价格: 面议

产品产地: 上海

品牌商标: 美迪西

更新时间: 2023-09-25T13:48:16

使用范围: null

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美迪西提供单B细胞抗体制备技术服务,包括单B细胞分选和单B细胞Ig基因转录,扩增,测序等。单B细胞抗体制备技术是目前新型、高效的抗体发现方法之一,具有速度快、通量高、以及抗体重轻链可变区天然配对的优势。

 

单B细胞分选

根据研究应用,可以随机或抗原选择性地从外周血或淋巴组织(如骨髓、脾脏)中分离单B细胞。对于B细胞分离,目前单B细胞分选方式有流式细胞分选法、 磁珠细胞分选法、 显微操作法、 激光显微切割法以及微流控分选法。 其中流式细胞荧光分选技术 (Fluorescence activated Cell Sorting,FACS)是目前一种成熟、 有效的单细胞分选方法。

 

单B细胞Ig基因转录,扩增,测序

从单个B细胞中构建互补DNA (cDNA)为同时分析表达的IgH和IgL链基因提供了一种正确的方法。通常,单B细胞cDNA合成是在用于细胞沉积和细胞裂解的设备中进行的(例如96孔板、纳米孔芯片等),这确保了方便处理大量样品并将交叉污染的风险降至最低。全长Ig可变区基因转录物通过巢氏PCR进行扩增,其中RT-PCR产物可作为第一轮PCR的样品进行进一步反应。

无论使用何种Ig可变区基因扩增策略,编码抗体特异性的单B细胞Ig可变区基因转录信息随后通过测序得到。然后利用各种数据库,如NCBI的IgBLAST、IMGT,可以很容易地识别和分析重排的V、D和J基因片段是否存在突变、插入和缺失。