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北京广信兴达科技有限公司
高效细胞转染仪

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产品名称： 高效细胞转染仪

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产品编号： 德国Amaxa公司NucleofectorTM 细胞核转染仪

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产品产地： 德国

品牌商标： 德国

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德国Amaxa公司NucleofectorTM 细胞核转染仪
 
Amaxa的Nucleofector＆#8482; 技术，让我们一起来共享：
l         世界上唯一直接把外源基因导入细胞核的创新性技术；
l         世界上唯一能在数小时内完成从实验操作到结果分析全过程的转染技术；
l         世界上唯一能高效转染原代细胞的非病毒介导的转染技术；
l         创新的全球共享细胞优化转染程序数据库；
l         高效转染DNA、siRNA和Oligo。
 
德国amaxa公司是一支处于快速发展中的生物技术团队,他们致力于开发一种高效率的、非滤过性病毒的基因转染技术---NucleofectorTM。该项技术特别适用于原代细胞和现有方法难于转染的细胞系的转染。
一．        NucleofectorTM技术简介：
 
1.       非病毒转染——NucleofectorTM技术是应转染原代细胞和难转染细胞系的需要而诞生的一种全新的转染技术。它采用独特的电场参数与细胞类型特异性的转染溶液相结合的方法，将细胞转染效率大大的提高；细胞的死亡率则大大的降低。
2.       DNA直接转入细胞核内---不分裂细胞的理想选择——不同于其它的非病毒转染，NucleofectorTM技术直接将DNA转到细胞核内。因此，使用NucleofectorTM技术转染细胞不再依赖细胞分裂，甚至于不分裂的细胞。
3.       从转染到蛋白质表达仅需要几小时——DNA是直接转入细胞核内的，因此，转染后几小时就可以检测到蛋白质的表达。多数细胞转染2-4小时后就能检测到基因表达。
 
二．        NucleofectorTM技术优势：
 
1.       转染效率高——因为DNA是直接转入其目的地---细胞核内，所以很容易得到高转染效率，包括以前很难转染的细胞，无论它是新鲜的或不分裂的原代细胞还是很难转染的细胞系。大多数细胞系和原代细胞的转染效率为50%--70%。
  
2.       转染速度快——由于基因转染不依赖细胞分裂，所以大大缩短了转染基因的表达时间。在大多数种类细胞的转染工作中，2-4小时就能检测到转染基因的表达，大大缩短了传统转染方法必须24-48小时才能表达的时间。这样加快了实验进程，整个实验只需一天就能完成。
 
3.       操作简单方便——NucleofectorTM转染技术操作简单方便，全部实验过程不到1小时就能完成。首先是NucleofectorTM核转染仪，传递电场参数；其次是NucleofectorTM转染溶液，待转染的细胞要悬浮在该溶液中。对于很多细胞类型，转染优化条件已经在Amaxa的实验室完成，因此NucleofectorTM技术不需要使用者做任何优化实验，大大的节省了其它方法所需的、耗时费力的、低效的转染条件的摸索；保证了实验结果的重复性，是进行细胞转染的理想选择。
 
三．        NucleofectorTM 技术的组成部分：
 
1.       NucleofectorTM 转染仪器
l         仪器中存储大量优化的转染程序
l         客户可以根据实验的需要选择相应的程序
l         转染仪重2.5KG，便于携带。
l         体积小（30x23x11cm），适宜无菌操作台上操作
2.       NucleofectorTM转染试剂
Amaxa提供一系列针对不同细胞系的特异性转染试剂，与转染仪中的优化程序配套使用，将DNA直接转入细胞核内，转染效率高，易操作，实验周期短。
除特异性转染试剂外，该公司还提供转染优化试剂盒，极大的方便了广大科研工作者。
 
四．        NucleofectorTM 技术技术参数
 
Cat. No: AAD-1001S                  
             体        积      30×23×11cm
             重        量         2.6 kg
             供 应 电  源      230 VAC+10%/-20%
             频        率        50-60 Hz
             消 耗 电  源      16 VA/fuse 0.315 A
             电源保护级别        I 级
 
 
五．        NucleofectorTM 技术的应用
 
1.       RNAi与NucleofectorTM技术——使用Nucleofector＆#8482;技术可以高效率地转染siRNA及其他DNA/RNA寡核苷酸进入原代细胞、难转的细胞系及常见细胞系。
 
2.       免疫学/血液学研究——使用NucleofectorTM技术，质粒DNA或寡核苷酸可以有效的直接转入新鲜分离的早期或刺激的人T、B细胞、树突状细胞、CD34+细胞。单核细胞、巨噬细胞或朗格罕氏细胞的实验方案正在研制过程中。K562，JURKAT及白血病细胞，如CLL或AML，已经可以得到高效率的转染。NucleofectorTM技术在免疫学和肿瘤研究领域开辟了一片新天地：基因功能和蛋白质的基础研究可以建立在尽量少地改变细胞代谢的基础上；细胞的短期基因修饰或许可以用于体内，如CTLs用于抗肿瘤；树突状细胞用于肿瘤接种疫苗。从而，NucleofectorTM技术对免疫系统细胞的基因治疗将具有决定性的意义。
 
免疫学 / 血液学原代细胞转染（部分）：
 
细 胞 类 型          试 剂 盒          产品编号           转 染效 率          质 粒
B cells-Human       Human B cell Kit   VPA-1001        20hours:36%±11%          H-2Kk
T cells-Human       Human T cell Kit   VPA-1002        16-24hours:66%±11%       H-2Kk
CD34 hematopoietic  Human CD34 Kit     VPA-1003        20hours:71%±11%          H-2Kk
progenitor cells-Human
Mesenchymal Stem    Human MSC Kit      VPE-1001         24hours:76%±7%           H-2Kk
Cells–Human (new)
Dendritic Cells     Human DC KitI     VPA-1004         24hours:49%±13%           eGFP
–Human (new)
 
3.       心血管研究——到目前为止，转染内皮细胞如HUVEC（Human Umbilical Vein Endothelial Cells）或人MVEC（Microvascular Endothelial Cells）已经可以实现。但是，繁琐的优化步骤及缺乏可重复性等因素一直制约着这些细胞的转染。使用NucleofectorTM技术转染这些细胞，简单且重复性好。此外，这项新技术还首次实现了快速将外源基因转入大动脉平滑肌细胞和心肌细胞。高效率的转染使得研究者可以成功进行生物化学研究，流式细胞仪及免疫化学分析。
 
心血管研究原代细胞转染（部分）：
 
细 胞 类 型             试 剂 盒    产品编号      转 染 效 率     质 粒
HUVEC(Human Umbilical        HUVEC Kit     VPB-1002  20-24hours:50%±10%   H-2Kk
Vein Endothelial Cells)
HCAEC(Human Coronary         HCAEC Kit     VPB-1001  20-25hours:42%±16%   eGFP
Artery Endothelial Cells)
HMVEC-L(Human Microvascular  HMVEC-L Kit    VPB-1003  20-24hours:52%±13%   eGFP
Endothelial Cells-Lung)(new)
AoSMC(Aortic Smooth Muscle   Human AoSMC Kit  VPC-1001  24hours:68%±11%   H-2Kk
Cells)-Human
Mesenchymal Stem Cells       Human MSC Kit   VPE-1001  24hours:76%±7%    H-2Kk
-Human
CD34 hematopoietic           Human CD34 Kit  VPA-1003  20hours:71%±11%   H-2Kk
progenitor cells-Human
 
4.     皮肤医学和组织工程——NucleofectorTM技术直接将DNA转入细胞核内，对原代细胞可以得到极高的转染效率，如人真皮纤维原细胞和人表皮黑素细胞。角化细胞和HaCaT的转染试剂盒很快可以投放市场，间质干细胞的转染试剂盒已经研制成功。因而，随着新方法应用于纤维化及伤口愈合研究，必将带给基础与临床皮肤医学研究蓬勃的生机；通过使软骨细胞的基因过度表达，也必将加深人们对骨关节炎致病机理的深入了解。NucleofectorTM技术很大程度上改良了皮肤和软骨的治疗方案，也必将对未来的基因治疗研究起到举足轻重的作用。
 
皮肤医学和组织工程原代细胞转染（部分）：
 
细 胞 类 型                         试 剂 盒   产品编号  转 染 效 率    质 粒
NHDF(Normal Human                  NHDF Kit     VPD-1001  5hours:89%±5%   H-2Kk
Dermal Fibroblasts)
NHEM-Neo(Normal Human Epidermal    NHEM Kit     VPD-1003  5hours:70%±13%  H-2Kk
Melanocytes-Neonatal)
Mesenchymal Stem Cells   Human Human MSC Kit    VPE-1001  24hours:76%±7%  H-2Kk
Keratinocyte–Human    Human Keratinocyte Kit   VPD-1002
Chondrocyte–Human      Human Chondrocyte Kit   VPF-1001  24hours:65%±10%  eGFP
 
5.       肿瘤研究——恶性癌变总是基因紊乱导致的不可调控的细胞无限生长。近几十年来，基因转移已经成为揭示这一过程的重要手段。迄今，有效的非病毒基因转染还仅限于细胞系，而且未涉及正常细胞周期的调控机制。NucleofectorTM技术首次实现了非病毒高效率转染正常原代细胞及相关恶性肿瘤细胞系。由此可以分析肿瘤发展过程基因表达及突变。因此，基因转移治疗恶性疾病将变得越来越重要，最终也将导致高效的、有针对性的和安全抗癌治疗方法的产生。NucleofectorTM技术的高效率转染原代细胞将使其成为细胞水平治疗策略的主要工具。
 
    肿瘤研究原代细胞转染（部分）：
 
细 胞 类 型           试 剂 盒    产品编号       转 染 效 率        质 粒
HUVEC(Human Umbilical       HUVEC Kit     VPB-1002     20-24hours:50%±10%   H-2Kk
Vein Endothelial Cells)
NHEM-Neo(Normal Human       NHEM Kit     VPD-1003       5hours:70%±13%      H-2Kk
Epidermal Melanocytes-Neonatal)
Dendritic Cells-Human    Human DC KitI   VPA-1004       24hours:49%±13%     eGFP
 
6.       神经生物学研究——应用NucleofectorTM技术，质粒或寡核苷酸可以有效地转染到原代神经细胞和细胞系中，转染后几小时就可以检测到蛋白质的表达。更重要的是，蛋白质表达的水平可以通过转入DNA量进行调控。目前，神经干细胞和星细胞等的实验方案正在研发中。    NucleofectorTM技术高转染率和高存活率扩展了神经生物学研究的视野，神经元细胞、神经干细胞及神经胶质细胞的高效转染必将在新药和细胞治疗中发挥很大的作用，并最终应用于临床。
 
神经生物学原代细胞转染（部分）：
 
 细 胞 类型        试 剂 盒        产品编号     转 染 效 率              质 粒
Neurons-Mouse     Mouse Neuron Kit  VPG-1001   48hours:58%±19%             eGFP
Neurons-Rat       Rat Neuron Kit    VPG-1003   cortical(72hours):59%±11%   eYFP
                                               hippocampal(24hours):54%±10%
Neurons-Chicken Chicken Neuron Kit  VPG-1002   24hours:43%±14%             eGFP
 
7.       干细胞研究——骨髓基质来源的MSC可以分化为多种细胞，如造骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、肌细胞或腱细胞，MSC这些潜在的分化能力赋予其在组织工程学研究中广泛的前景。MSC不仅在体内具有潜在的分化，在体外也可以分化为软骨细胞或造骨细胞，这使其成为再生医学理想的研究工具，用于骨形成或软骨修复。对人MSC的研究一直受到只能用逆转录病毒进行基因修饰的局限，而NucleofectorTM技术的应用则首次实现了高效率非病毒转染MSC。使用NucleofectorTM技术转染MSC的效率高达85%。    使用NucleofectorTM技术转染CD34+造血干细胞，由于DNA是直接转入细胞核中，所以可以转染未受刺激的CD34+细胞，通常转染效率都在70%以上。
 
干细胞研究原代细胞转染（部分）：
 
   细 胞 类 型                   试 剂 盒      产品编号    转 染 效 率      质 粒
CD34 hematopoietic             Human CD34 Kit  VPA-1003   20hours:71%±11%   H-2Kk
progenitor cells-Human
Mesenchymal Stem Cells-Human   Human MSC Kit VPE-1001     24hours:76%±7%     H-2Kk
Embryonic Stem Cells-Murine    Mouse ES cell Kit
 
 
8.       其它细胞系转染——NucleofectorTM技术的使用者已经对下列细胞系进行了成功转染，如您的工作需要进行以下细胞系的转染，请与我们联系。
 
23132/87      Colo-205     MEG-01    SW13
    32D           DT40         MNT-1     SW480
    3T3-L1        EL-4         Namalwa   T1165
    ATDC          FDC-P        NK3.3     T2
    BAF-3         H1299        NK92      TF-1
    b-END         HL-60        NKL-1     THP-1
    BJAP          h-tert BJ1   NRK 52E   TK-1
    BJMC3879      Hydra cells  NS 0      U937
    BW α,β-     Karpas 299   OCI-AML1a UT-7 POS1
    C2C12         KG1          Ramos     y189/111
    C6            L-52         RAW 264.7 YT
    CA46          LNCap        RBL       Z70
    CEM.NKR       MDA-MB231    RPMI 8226 ZYGF
    CH27          MDCK         SAOS-2
 Colo-201      MDCK II      SP2/0