肿瘤动物模型
产品名称： 肿瘤动物模型
英文名称： tumor animal model
产品编号： IBSTAM
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上海艾博思生物技术有限公司
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异种移植肿瘤模型 （肿瘤细胞系）
实验方案：
1. 取对数生长期的细胞收集重悬至无血清培养基中，按照建模实验的接种密度调整悬液至终浓度。
2. 雌性BALB/c 裸鼠皮下接种肿瘤细胞悬液。
3. 动物每天监测，观察日常行为表现。利用游标卡尺每周测量三次肿瘤面积（长×宽），肿瘤体积以公式（长 ×宽2)/2计算。
4. 肿瘤体积达到100-200 mm3时，进行随机分组，剩余的动物进行安乐死。
5. 动物每天给药之前测量体重，肿瘤体积每周测量三次。
Brief protocol of Cell line derived xenograft model:
1. Cell concentrations were adjusted after cell was harvested;
2. Each animal received subcutaneous (s.c.) inoculation at the back of armpit of foreleg with 0.2 ml cell suspension in 0.9% normal saline.
3. Animals were monitored daily by general clinical observation and tumor growth. Tumor areas (length×width) were measured daily by using Vernier calipers and tumor volumes were calculated based on the following formula: tumor volume ＝(length×width2)/2.
4. After the tumor grown up to 100-200 mm3, animal will be randomly divided and start dosng.
5. Tumor volumes will be measured three times per week before dosing.
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异种移植肿瘤模型 （肿瘤细胞系）
实验方案：
1. 取病人瘤块，切成小块，皮下接种瘤块；
2. 动物每日监测，观察日常行为表现。利用游标卡尺每周测量三次肿瘤面积（长×宽），肿瘤体积以公式（长 ×宽2)/2计算。
3. 取不同时间点血样作检测用；
4. 实验结束后收取肿瘤组织作病理分析或体外检测。
Brief protocol of Patient derived xenograft model:
1. The experiments will involve implanting a fragment of tumor tissue subcutaneously in the flank area of a mouse using a 10 - 18 gauge trocar (for minced or fragments). The subcutaneous implanted tumor inoculums will have a maximum volume of 0.3 ml.
2. Animals will be observed daily and monitored a minimum of 2 to 3 times weekly for tumor size and/or body weight. Mice with tumors will be sacrificed if the tumor weight is greater than 20% of the mean body weight in the treatment group.
3. Blood samples may be collected manually at various time points.
4. Tissue may be harvested for histological or in vitro analysis at the end of the study.
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肿瘤转移模型 （metastatic tumor model）
尾静脉注射建立肿瘤转移模型，模拟了肿瘤转移的血行转移，是一种比较常用的建立肿瘤转移模型的手段。常用的实验方案如下：
1. 体外细胞培养传代，取对数生长期细胞计数，用于接种；
2. 尾静脉注射细胞，第七天开始给药治疗；
3. 称量体重，一周2次或每两天一次；肿瘤计数及病理分析。
Brief protocol of metastatic tumor model
1. Tumor cells will be maintained in vitro as a monolayer culture in L-15 medium supplemented with 10% heat inactivated fetal bovine serum. The cells growing in an exponential growth phase will be harvested and counted for tumor inoculation.
2. Each mouse will be inoculated with tumor cells in 0.1 ml of PBS by tail vein. The treatments will be started at day 7 after the tumor cell injection.
3. Body weights will be measured twice weekly (or every other day). At the study end, necropsy will be conducted and the number of tumor nodules will be counted and recorded. Tissue will be fixed in 4% Paraformaldehyde for histopathological analysis (H.E. staining).
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活体成像 （In vivo imaging）
活体动物体内光学成像技术（optical in vivo imaging），其基本原理是利用生物发光（bioluminescence）或者荧光（fluorescence）标记活体动物中的生物分子或者细胞，在超低温高灵敏CCD相机下可以捕捉到活体中上述的生物发光或者荧光，从而可以在活体上实时研究生物分子和细胞在疾病发生中的变化过程。荧光素酶(Luciferase)是一种常用的信号分子，可以用来标记肿瘤细胞, 在活体成像技术中也得到了广泛的应用。与传统肿瘤检测相比，活体成像具备如下优点：灵敏度高，在接种当天即可检测到荧光值；且荧光值读数客观, 易于分析；活体成像结果直观，可直接观察肿瘤的生长及转移情况；可以对同一个研究个体进行长时间反复跟踪成像，避免靠不同时间宰杀动物获得实验数据，降低了实验成本以及动物组间人为操作差异。
除了luciferase这种最常用的信号分子，其它的一些信号分子，比如DsRed等，也可以用于活体成像技术，另外，肿瘤细胞表面marker的特异性染料，也可以用于标记肿瘤细胞，并用于活体成像观察，比如靶向integrin的染料RGDyK-Cy7。
正因为活体成像的这些特色以及新技术的开发，目前活体成像技术已成为广泛应用于医学、生物学及药物开发等研究领域的前沿技术，特别是在肿瘤研究中，本公司还开发了一系列luciferase高表达肿瘤细胞系，包括SGC 7901 人胃腺癌细胞；A-549 人非小细胞肺癌细胞；BEL-7402 人肝癌细胞；SMMC-7721 人肝癌细胞；HepG2 人肝癌细胞；DLD-1 人结直肠腺癌上皮细胞；HCT 116 人结肠癌细胞；22RV1 人前列腺癌细胞；MDA-MB-231 人乳腺癌细胞；MCF7 人乳腺癌细胞；CNE 人鼻咽癌细胞；Hela 人宫颈癌细胞等十余种高表达luciferase的肿瘤细胞系，可用于活体成像技术。