谷草转氨酶测定试剂盒 微量法
产品名称: 谷草转氨酶测定试剂盒 微量法
英文名称: Micro Glutamic-oxalacetic Transaminase(GOT)Assay Kit
产品编号: BC1565
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2024-11-15T08:48:53
使用范围: null
- 联系人 : 索莱宝-龚思雨
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- 所在区域 : 北京
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产品内容:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体3.5 mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:液体3.5 mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体30 mL×1瓶,4℃保存;
标准品:液体1mL×1支,20μmol/mL丙酮酸钠标准品,4℃保存。
产品说明:
GOT( 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
GOT催化 α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二**苯肼反应生成2,4-二**苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定505nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。
实验需自备的仪器和用品:
可见分光光计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样品测定的准备
1、 细胞或微生物样品的制备 :
先收集细胞或微生物样品到离心管内,弃上清,按照每500万细胞或微生物加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。3500g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:
称取约0.1g组织,加入1mL提取液进冰浴行匀浆。3500g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
二、测定操作表
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。
2、 标准曲线的测定
首先将标准品稀释至20μmol/mL,按下表 混合标准品和试剂一得到相应浓度标准管:
标准品(μL)
试剂一(μL)
标准管浓度(μmol/mL)
22.5
7.5
1.5
15
15
1
12
18
0.8
6
24
0.4
3
27
0.2
1.5
28.5
0.1
0.75
29.25
0.05
0
30
0
3、 在EP管中加入下列试剂
试剂名称(μL)
测定管
对照管
标准管
待测样本
5
试剂一
25
25
标准液
30
混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热30min
试剂二
25
25
25
待测样本
5
混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)准确反应20min
试剂三
24TUNEology 波长可调检测卡盒-->