MTT 细胞增殖检测试剂盒

概述

MTT细胞增殖检测试剂盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物Formazan，在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解，然后通过酶标仪可以测定570 nm波长附近的吸光度。

应用

细胞增殖与毒性检测

组份

Component A: MTT; Component B: MTT Solvent; Component C: Formazan Solubilization Solution

MTT 细胞增殖检测试剂盒 产品编号：E606334 产品包装：250 Tests / 500 Tests 产品简介 细胞增殖检测分析是测定细胞周期调控因子，如：生长因子，细胞因子，促细胞分裂素及药物效果的直接方法之一。在细胞 增殖过程中乳酸脱氢酶的活性会增加，而四唑盐 (如： MTT, XTT, WST-1 或 WST-8)在代谢活跃的细胞环境中会逐渐减少， 形成能够改变培养基颜色的甲臜（Formazan）染料。 MTT 细胞增殖检测试剂盒被广泛应用于由诱导剂和抑制剂引起的细胞增殖活性变化的体外检测。其检测原理为活细胞线粒体 中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在特定溶剂存在 的情况下，甲臜可以被完全溶解。该试剂盒可以用于一些生物活性因子的活性检测、药物筛选、细胞毒性测定等。 试剂盒组分 组分 250 次 500 次 组分 A：MTT Reagent 组分 B： MTT Solvent 组分 C： Formazan Solubilization Solution 12.5 mg X 1 1.25 mL X 2 27.5 mL X 1 25 mg X 1 5 mL X 1 27.5 mL X 2 说明书 1 1 保存条件 MTT Reagent 和 MTT Solvent 需 2~8°C 避光保存；Formazan Solubilization Solution 室温保存。保质期为 12 个月。 使用方法 .注意事项: 使用前该试剂盒需要在室温解冻。 1. 所有的管子在打开之前需要先离心。 2. 使用96孔板进行检测时，通常细胞增殖检测实验每孔加入100 μL 2000个细胞，细胞毒性检测实验每孔加入100 μL 5000 个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定)。按照实验需要，进行培养并给 予 0-10 μL 特定的药物刺激。在培养箱中孵育 24 小时。 注意事项: 每个样品建议设置 5 个复孔。 3. MTT 溶液的配制：用 MTT Solvent(组分 B)溶解 MTT Reagent (组分 A)，配制成 5 mg/ml 的 MTT 溶液。配制后即可使 用，或直接-20°C 避光保存，也可以根据需要适当分装后-20°C 避光保存。 4. 每孔加入 10 μL MTT 溶液，使每个孔中的 MTT 得终浓度为 0.5 mg/ml。 5. 轻轻混匀后，5%CO2，37℃培养箱中孵育 4 小时。 注意事项： 孵育后，蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）沉积在细胞中。 6. 小心吸取每个孔中的培养基已防止细胞单层破裂。 7. 每孔加入 100 μL Formazan Solubilization Solution（组分 C） 8. 将 96 孔板放在振荡器上轻轻震荡 10 分钟，直至在普通光学显微镜下观察发现甲臜全部溶解。, 9. 在酶标免疫检测仪 570 nm 测定吸光度。 Sangon Biotech 警告！ 使用前，请仔细阅读说明书，为了您的安全，请佩戴手套，护目镜，或是其他保护措施。本试剂盒仅用于研发，不可药用， 家庭或其他。