2×Bes Taq MasterMix(含染料)-RNAi技术-试剂-生物在线
上海沪震实业有限公司
2×Bes Taq MasterMix(含染料)

2×Bes Taq MasterMix(含染料)

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产品名称: 2×Bes Taq MasterMix(含染料)

英文名称: 2×Bes Taq MasterMix(With Dye)

产品编号: HZ0104

产品价格: 0

产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

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 2×Bes Taq MasterMix(含染料)

中文名称:2×Bes Taq MasterMix(含染料)
英文名称:2×Bes Taq MasterMix(With Dye)
产品规格:1ml|5ml|25ml
本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,超过98%的PCR扩增能一次成功,同时复杂模板也能得到有效扩增,并可最大限度地减少人为误差和污染。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。

产品组成

组份 1ml 5ml 25ml
2×Bes Taq MasterMix(With Dye) 1ml 5×1ml 5×5ml
ddH2O 1ml 5×1ml 5×5ml


注意:2×Bes Taq MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

质量控制
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

使用方法
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂 50μl反应体系 终浓度
2×Bes Taq MasterMix(With Dye) 25μl
Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
ddH2O up to 50μl  


注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤 温度 时间 循环数
预变性 94℃ 2 min  
变性 94℃ 30 s 25-35 个循环
退火 55-65℃ 30 s
延伸 72℃ 30 s
终延伸 72℃ 2 min  



注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件:-20℃,避免反复冻融。 

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!