甲基化MSP检测：

DNA甲基化是一种表观遗传修饰，它是由DNA甲基转移酶（DNA methyl-transferase, Dnmt）催化S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧啶转变为5-甲基胞嘧啶（mC）的一种反应，在真核生物DNA中，5-甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基。CG二核苷酸是最主要的甲基化位点，被称为CpG岛，它在基因组中呈不均匀分布，存在高甲基化、低甲基化和非甲基化的区域。CpG岛主要位于基因的启动子和第一外显子区域，约有60％以上基因的启动子含有CpG岛，一般而言DNA甲基化会抑制基因的表达。

CpG甲基化的研究在肿瘤的研究中有着非常主要的地位，通过基因启动子区及附近区域CpG岛胞嘧啶的甲基化可以在转录水平调节基因的表达，从而引起相应基因沉默，去甲基化又可恢复其表达。DNA甲基化在生理情况下就参与了控制基因的时空表达，在肿瘤发生时，肿瘤细胞全基因组低甲基化是一个重要特征。肿瘤细胞基因组甲基化的程度与正常细胞相比仅为20-60% , 同时伴有局部区域基因的高甲基化,包括肿瘤抑制基因、抑制肿瘤转移和浸润的基因、细胞周期调节基因、DNA修复基因、血管形成抑制基因等。

甲基化特异性聚合酶链反应（methylation-specific PCR，MSP），其作用原理基于DNA经亚硫酸氢钠处理后，非甲基化序列的胞嘧啶转变为尿嘧啶，而甲基化序列则保持不变，随后用具有高度特异性的甲基化引物和非甲基化引物进行扩增。

MSP实验的主要步骤包括：确定检测基因，设计甲基化引物及非甲基化引物；提取基因组DNA，纯度、含量检测；基因组DNA亚硫酸氢钠修饰，DNA回收纯化；PCR扩增反应，琼脂糖凝胶电泳以及结果分析。