甲基化分析服务

DNA甲基化研究是表观遗传学的重要内容，真核生物中的甲基化仅发生于胞嘧啶，即在DNA甲基化转移酶的作用下使CpG二核苷酸5’-端的胞嘧啶转变为5’-甲基胞嘧啶。DNA甲基化通常抑制基因表达，去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。这种DNA修饰的方式在脊椎动物的胚胎发育过程中起着重要的调控作用，参与多种疾病包括各种肿瘤的发病机理，是目前表观遗传学研究的热点。

服务内容描述

通过MSP或BSP的方法调查基因调控区域的甲基化状况

1.甲基化特异性的PCR（Methylation-specific PCR，MSP）

用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变；设计针对某一待测位点的甲基化和非甲基化引物进行PCR扩增，通过电泳检测MSP扩增产物判定待测样本是否存在甲基化位点。

2.亚硫酸氢盐测序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）

用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，则未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变。针对要调查的区域设计BSP引物进行PCR扩增，对扩增产物进行测序就可以判断哪些CpG位点发生了甲基化；一般将PCR产物克隆后进行测序成功率会比较高。

客户方提供

·要调查的基因名称

·要调查的甲基化区域或位点

·临床科研样本，保证样本质量（详见服务申请单）

送样要求

·细胞（≥10⁵个）                                             ·组织（≥100mg，黄豆大小）

·全血（≥0.5ml）                                   ·基因组DNA（≥5ug）

实验流程

a甲基化扩增引物设计合成调试

b样品基因组DNA抽提

c亚硫酸氢盐处理

d扩增、克隆、测序

检测周期

常规检测任务3－4周内完成，具体根据样本量和检测的基因数而定。

报告内容

提供操作流程、电泳图谱、测序图谱、初步分析数据等。（甲基化报告示例）