采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠HNF4a抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的HNF4a与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠HNF4a抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠HNF4a抗体与结合在包被抗体上的大鼠HNF4a结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，HNF4a浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中HNF4a的  Rat HNF4a (Hepatocyte Nuclear Factor 4 Alpha) ELISA Kit  中文名称  大鼠肝细胞核因子4a(HNF4a)酶联免疫吸附测定试剂盒  货号  E-EL-R0498  种属  Rat/大鼠  规格  96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)  检测方法  双抗体夹心法  检测范围  ~0  灵敏度      规格  保存  Micro ELISA Plate   8×12 / 8×6*  4℃  Reference Standard   2/1 支*  4℃  Reference Standard & Sample Diluent   1瓶 20mL/12mL*  4℃  Concentrated Biotinylated Detection Ab   1支 120μL/70μL*  4℃  Biotinytated Detection Ab Diluent   1瓶 10mL/6mL*  4℃  Concentrated HRP Conjugate   1支 120μL/70μL*  4℃(避光)  HRP Conjugate Diluent   1瓶 10mL/6mL*  4℃  Concentrated Wash Buffer (25×)    1瓶 30mL/16mL*  4℃  Substrate Reagent   1瓶 10mL/6mL*  4℃(避光)  Stop Solution   1瓶 10mL/6mL*  4℃  Plate Sealer   5/3 张*
  Manual   1 份
  Certificate of Analysis   1 份
  *: [96T/48T]在各孔中加入标准品或样品各100μL， 37℃孵育90分钟
2. 加入100μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟
3. 洗涤3次
4. 加入100μL酶结合物工作液， 37℃孵育30分钟
5. 洗涤5次
6. 加入90μL底物溶液， 37℃孵育15分钟左右
7. 加入50μL终止液，立即在450nm波长处测量OD值
8. 结果计算
http://www.elabscience.cn/index.php/product/view/aid/19867.jsp