RNAi全套产品服务

产品简介

当病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内，并利用宿主细胞进行转录时，宿主细胞常产生一些dsRNA。宿主细胞胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA（大约21～23 bp），即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。在正常生物体内，RNA干扰起到抗病毒、抑制基因过量表达的作用。

产品组成

    定制RNAi产品

    Easy RNAi产品

    RNAi全套产品

产品比较

比较项目	化学合成siRNA	DNA载体shRNA	Lentiviral-shRNA	Adenoviral-shRNA
siRNA结构	双链RNA或发夹结构RNA	发夹结构RNA	发夹结构RNA	发夹结构RNA
RNA干扰持续时间	<72小时	<10天	>30天	～10天
适合的细胞系	转染效率大于70%的细胞	转染效率大于20%但是可以传代的细胞	几乎所有细胞	几乎所有细胞
单次制备费用	低	中	较高	高
重复使用费用	中	低	低	低
是否可自行扩增	不可以	可以	不可以	不可以
瞬时干扰实验	转染效率大于70%的细胞	转染效率大于20%但是可以传代的细胞	几乎所有细胞	几乎所有细胞
构建稳定表达siRNA的细胞株	不满足	满足，但有风险	满足，可以同时制备多种稳定表达细胞系	不满足
组织特异性干扰实验	不满足	满足	满足	满足
可诱导RNA干扰实验	不满足	满足	满足	满足
基因沉默后示踪实验	不满足	满足	满足	满足
裸鼠荷瘤实验	低重复性	低重复性	高重复性	高重复性
干细胞分化实验	不满足	不满足	满足	不满足
转基因knockdown实验	不满足	不满足	满足	不满足

 
应用领域

后续服务

   1. 多种同类功能试验对阳性基因的验证；

   2. 多细胞的验证；

   3. 过表达该基因的回复验证；

   4. 体内试验的验证（动物模型）；

   5. 功能基因下游的筛选（敲减后细胞的芯片检测，Western Blot验证）；

   6. 下游基因操作工具的制备；

   7. 病例样本的检测（组织芯片检测）；

   8. 基因芯片检测；

   9. 蛋白质芯片检测；

参考文献

1. "Li M, Rossi JJ." Lentiviral Vector Delivery of siRNA and shRNA Encoding Genes into Cultured and Primary Hematopoietic Cells. Methods Mol Biol. 2005;309:261-72.  
 
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