核酸快速银染试剂盒

中文名称：核酸快速银染试剂盒
英文名称：Fast Silver Stain Kit for Nucleic Acids
产品规格：25次
核酸快速银染试剂盒是一种快速简单、可用于聚丙烯酰胺凝胶中的核酸检测的试剂盒。其检测原理是：银离子(Ag+）可与核酸形成稳定的复合物，随后Ag+在碱性环境下被还原剂如甲醛还原成银颗粒，后者通过显色可把核酸电泳条带染成黑褐色。该方法检测灵敏度比EB高达200倍，能检测到10ng的DNA条带，常用于检测SSR标记、SNP标记等。
本试剂盒可足够用于25块常规的8×10cm凝胶的银染。
产品组份：

保存条件：
常温保存，开封后一年有效。

注意事项：
1、由于银染非常灵敏，操作时请尽量使用高纯度的水，并确保所使用器皿非常清洁，最好使用洁净的玻璃器皿。操作时必须戴手套，避免皮肤和凝胶直接接触。
2、需自备无水乙醇及MilliQ级纯水。
3、下述使用说明中各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶，各种溶液使用量需按凝胶面积的比例放大，对于更厚的凝胶，作用时间需按照厚度比例适当延长。
4、本说明书所指的常温温度为20-25℃，操作温度较低时由于溶液的扩散能力下降，各步骤需适当延长时间。
5、银染基本显色液(10×)在低温环境下可能会出现沉淀，可在30-37℃水浴中溶解，充分混匀后使用。
使用方法：
一、漂洗步骤：
电泳结束后，凝胶中加入100ml MilliQ级纯水，在摇床上常温摇动2分钟，摇动速度为60-70rpm；重复此步骤1次。
二、银染步骤：
1、银染：
弃水，加入100mL即用型染色液，在摇床上常温摇动5分钟，摇动速度为60-70rpm。

【注】：
● 即用型染色液配制后需在20分钟内使用。
2、水洗涤：
弃原有溶液，加入100mL MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动15-20秒，摇动速度为60-70rpm。
【注】：
● 水洗涤的时间不能超过20秒。
三、显色步骤：
弃水，加入100mL银染显色液，在摇床上室温摇动3-10分钟，直至出现比较理想的预期核酸条带，摇动速度为60-70rpm。

【注】：
● 银染显色加速液(500×)有刺激性气味，建议在通风橱内操作；
● 银染显色液配制后需在20分钟内使用。
四、终止步骤：
弃银染显色液，加入100mL MilliQ级纯水，在摇床上常温摇动3-5分钟，摇动速度为60-70rpm。
五、保存：
可在MilliQ级纯水中保存；或采用适当的方式制备成干胶。
常见问题：
● 背景太深：
（1）显色时间过长。通常显色反应会在10分钟内结束，显色反应时间过长会导致背景很深。
（2）水的纯度太低。需使用大于16MΩ·cm的高纯度水。
● 核酸条带非常浅：
（1）银染后水洗涤时间过长。在银溶液染色时需严格控制水洗涤的时间，水洗涤时间不能超过20秒，否则会导致过多的银离子被洗去，导致检测灵敏度下降。
（2）核酸银染显色加速液（500×）失效。核酸银染显色加速液（500×）不能低温保存，低温保存会导致加速液失效。
● 凝胶上出现小点或其它非核酸的痕迹：
（1）凝胶没有充分被溶液浸没。请注意选择大小合适的容器，并加入足量的各种溶液，同时需保持适当的混匀速度确保凝胶可以被溶液浸没。
（2）用于银染的容器没有充分洗涤干净。容器需先用洗涤剂充分洗涤，随后用自来水充分冲洗，最后用高纯度水再洗涤数次。该容器最好能专用于银染，并注意避免各种可能的污染。
（3）指纹或其它压痕。请注意戴手套操作，切勿直接接触皮肤。操作时请注意尽量勿挤压、折叠或摩擦凝胶。
（4）有金属物质接触凝胶。金属物质例如金属镊子等接触凝胶会出现非特异性痕迹。 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！